豬附紅細(xì)胞體體外培養(yǎng)及有效藥物篩選研究.pdf

1、豬附紅細(xì)胞體病的存在，不僅給畜牧業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟(jì)損失，還嚴(yán)重威脅著人類身體健康。豬附紅細(xì)胞體的體外培養(yǎng)方法不成熟，阻礙了人們對(duì)本病的研究。而且，目前由于對(duì)附紅細(xì)胞體病了解甚少，已嚴(yán)重造成臨床上濫用抗豬附紅細(xì)胞體藥物。本研究采用三種方法研究了豬附紅細(xì)胞體的體外培養(yǎng)：方法一，用人和豬等8種動(dòng)物的陰性紅細(xì)胞來培養(yǎng)豬附紅細(xì)胞體；方法二，根據(jù)培養(yǎng)霉形體的方法，在霉形體固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基上來培養(yǎng)豬附紅細(xì)胞體；方法三，根據(jù)VeroE-6細(xì)胞培養(yǎng)病

2、毒方法，在完全培養(yǎng)基3中來培養(yǎng)豬附紅細(xì)胞體，在掃描電鏡下觀察豬附紅細(xì)胞體在VeroE-6上附著情況，用PCR法鑒定培養(yǎng)物的沉淀物中是否含有豬附紅細(xì)胞體。同時(shí)，并在方法一的體外培養(yǎng)系統(tǒng)中，對(duì)市場(chǎng)上報(bào)道的幾種有效藥物進(jìn)行了篩選。 在方法一的體外培養(yǎng)系統(tǒng)中，豬附紅細(xì)胞體在人和豬等8種動(dòng)物紅細(xì)胞上皆能生長(zhǎng)繁殖。豬紅細(xì)胞對(duì)豬附紅細(xì)胞體最為易感，且感染率最高，可達(dá)99％。而雞紅細(xì)胞對(duì)豬附紅細(xì)胞體最不易感，且感染率一直低于5％。傳代培養(yǎng)時(shí)，豬

3、紅細(xì)胞傳代可達(dá)36代以上(每12小時(shí)傳一代)；人、兔、小白鼠、山羊、綿羊、狗的紅細(xì)胞傳代可達(dá)18代以上(每24小時(shí)傳一代)；牛紅細(xì)胞傳代可達(dá)24代以上(每12小時(shí)傳一代)。在方法二的體外培養(yǎng)系統(tǒng)中，在固體和液體培養(yǎng)基上均沒有附紅細(xì)胞體生長(zhǎng)與繁殖。在方法三的體外培養(yǎng)系統(tǒng)中，在掃描電鏡下可觀察到附紅細(xì)胞體在VeroE-6上附著，但能否大量增值及能否傳代沒有研究。在藥物篩選試驗(yàn)中，篩選出由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院寄生蟲研究室研發(fā)的附紅凈不僅藥效