水貂細小病毒的分離鑒定及卵黃抗體的制備.pdf

1、水貂傳染性腸炎又名水貂病毒性腸炎,是由水貂腸炎病毒(MEV)引起的一種急性、高度接觸性、致死性傳染病。該病廣泛存在于世界各國,是威脅水貂養(yǎng)殖的最大疾病之一,給養(yǎng)貂業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。在我國水貂傳染性腸炎的預防主要是定期免疫接種,但近年來應用疫苗免疫失敗的現(xiàn)象時有發(fā)生,有時呈地方性流行。發(fā)病水貂除采取對癥治療外,沒有有效的治療藥物,為此,我們開展水貂的流行病學研究工作,并在此基礎上,開展抗水貂病毒性腸炎抗體的研究工作。
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2、研究應用貓腎F81細胞從疑似MEV感染的水貂病料中分離病毒,通過血凝試驗、PCR等方法對分離得到的病毒進行鑒定。同時對分離得到的病毒和大連送檢的水貂病料的VP2基因進行了測序和遺傳進化分析。在此基礎上,以分離得到的病毒為抗原,選擇種屬關系遠的蛋雞作為免疫對象,制備卵黃抗體。利用氯仿和硫酸銨結合的方法提純卵黃抗體,應用血凝抑制試驗評定抗體的效價。結果利用F81細胞成功分離出一株病毒,命名為MEV-ZYL-1,鑒定結果表明這是一株水貂細小病

3、毒強毒株,具有良好的免疫原性。序列測定結果表明,MEV-ZYL-1與引起大連水貂腸炎的病毒同源性100％,VP2基因全長1755個核苷酸,編碼584個氨基酸,與MEV標準毒株MEV-type2 VP2基因大小相同,已上傳Genebank,序列登錄號為GU272028、GU272029?；诩毿〔《镜南到y(tǒng)發(fā)生表明,MEV-ZYL-1與2009年分離株Manzhouli、Suning親緣關系近,為目前國內(nèi)流行株。用MEV-ZYL-1為種毒制