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1、本文首先通過微生物發(fā)酵試驗(yàn)篩選出了能夠有效降解棉粕中有害成分游離棉酚(FreeGossypol,F(xiàn)G)的微生物菌株,并且優(yōu)化出了該微生物脫毒棉粕的最佳發(fā)酵工藝條件,結(jié)果表明,料水比1∶0.94、發(fā)酵時(shí)間62.33h、裝料量30.96g/150mL、接種量10%、麩皮量為20%時(shí)脫毒率最大(接近86%);隨后進(jìn)行了發(fā)酵棉粕在肉仔雞日糧中的應(yīng)用試驗(yàn)研究,結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,發(fā)酵棉粕未對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)、免疫器官指數(shù)及表觀能量和蛋白
2、代謝產(chǎn)生顯著影響,當(dāng)添加量為20%時(shí),腸道乳酸菌顯著增加(P<0.05),大腸桿菌顯著降低(P<0.05),且最節(jié)省成本。因此,發(fā)酵脫毒棉粕的最佳添加量為20%。 試驗(yàn)一發(fā)酵菌種的篩選試驗(yàn)篩選了能夠高效降解棉酚的微生物菌種。首先以白地霉、扣囊、熱帶假絲酵母、產(chǎn)朊假絲酵母、3株黑曲霉和2株米曲霉9種菌株為候選菌種,使用無碳源液體培養(yǎng)基各30ml,另加棉粕2g進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵,25~28℃,250r/min,搖床48h后取出各菌種發(fā)酵液
3、測(cè)定游離棉酚含量,結(jié)果表明,產(chǎn)朊假絲酵母對(duì)棉酚的降解率在70%左右,其他菌種未見顯著效果;接著再用產(chǎn)朊假絲酵母固態(tài)發(fā)酵棉粕和麩皮混合物,150ml三角瓶裝料30g,28℃靜置培養(yǎng)48h,每12h進(jìn)行一次攪拌,48h后取出發(fā)酵物烘干、粉碎、測(cè)定棉酚含量。結(jié)果表明,產(chǎn)朊假絲酵母固態(tài)發(fā)酵棉粕脫毒率在65%~70%之間。這表明產(chǎn)朊假絲酵母具有有效降解棉酚的作用。 試驗(yàn)二棉籽粕發(fā)酵工藝條件的優(yōu)化本試驗(yàn)優(yōu)化了產(chǎn)朊假絲酵母降解棉粕中游離棉酚的
4、最佳工藝參數(shù)。首先利用SAS軟件的Plackett-Burman設(shè)計(jì)法對(duì)產(chǎn)朊假絲酵母固態(tài)發(fā)酵棉粕的發(fā)酵參數(shù)進(jìn)行了篩選,得出3個(gè)影響較大的重要因素,分為:料水比、發(fā)酵時(shí)間和裝料量,然后再用SAS軟件二次響應(yīng)面分析法進(jìn)行回歸分析,得到了各因素的最佳水平值。結(jié)果表明,料水比1∶0.94、發(fā)酵時(shí)間62.33h、裝料量30.96g/150mL時(shí)脫毒率(85.99%)最高,與優(yōu)化前相比提高近20%;隨后在響應(yīng)面優(yōu)化基礎(chǔ)上對(duì)麩皮和接種量進(jìn)行了單因素優(yōu)
5、化。結(jié)果表明,接種量10%、麩皮量為20%時(shí)脫毒率相對(duì)最高。棉粕發(fā)酵后粗蛋白含量未有變化,可溶性蛋白從6.96%提高到10.2%,必需氨基酸——賴氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等的含量增加。發(fā)酵工藝參數(shù)優(yōu)化后,棉粕的脫毒率有所提高,且發(fā)酵后棉粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值有所改善。 試驗(yàn)三發(fā)酵棉籽粕對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能及相關(guān)指標(biāo)的影響本試驗(yàn)探討了發(fā)酵棉粕對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)、免疫器官指數(shù)和蛋白能量代謝的影響。選用192只1日齡AA肉仔雞,隨機(jī)分為
6、4個(gè)處理組,每處理6個(gè)重復(fù),每重復(fù)8只雞,對(duì)照組飼喂玉米豆粕基礎(chǔ)日糧,處理組1-3分別添加發(fā)酵棉粕15%、20%和30%替代部分豆粕。試驗(yàn)期6周。試驗(yàn)結(jié)果顯示,發(fā)酵棉粕處理組的肉仔雞生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)、免疫器官指數(shù)和表觀蛋白代謝值與對(duì)照組相比未有顯著差異(p>0.05)。綜合考慮經(jīng)濟(jì)成本認(rèn)為,發(fā)酵棉粕的最佳添加量為20%。 試驗(yàn)四發(fā)酵棉籽粕對(duì)肉仔雞腸道微生物區(qū)系的影響本試驗(yàn)采用傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)和PCR-DGGE兩種方法研究了發(fā)酵棉粕
7、對(duì)肉仔雞盲腸幾種主要微生物的數(shù)量及區(qū)系的影響。選用192只1日齡AA肉仔雞,隨機(jī)分為4個(gè)處理組,每處理6個(gè)重復(fù),每重復(fù)8只雞,對(duì)照組飼喂玉米豆粕基礎(chǔ)日糧,處理組1-3分別添加發(fā)酵棉粕15%、20%和30%替代部分豆粕。試驗(yàn)期6周。試驗(yàn)最后一天從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)抽取1只肉仔雞進(jìn)行屠宰,無菌采集盲腸食糜,分析盲腸微生物數(shù)量和區(qū)系。結(jié)果表明,當(dāng)發(fā)酵棉粕添加量為15%和20%時(shí),盲腸乳酸桿菌的數(shù)量顯著增加(P<0.05),同時(shí)大腸桿菌數(shù)量顯著減少
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