橙色莫桑比克羅非魚（♀）和荷那龍羅非魚（♂）的雜交試驗.pdf

1、為了培育新的羅非魚雜交種，本試驗采用羅非魚種間雜交的方法，以橙色莫桑比克羅非魚Oreochromis mossambicus(♀)和荷那龍羅非魚Oreochromis hornorum(♂)為親本，繁殖得到了雜交F1(莫荷魚)。利用蛋白質(zhì)電泳技術研究了兩親本的同工酶組織特異性，并運用AFLP分子標記技術分析了兩親本種群內(nèi)、種群間的遺傳多樣性，同時對兩親本及其雜種F1進行了低溫致死、耗氧率以及耐鹽試驗，并比較了莫荷魚與尼奧魚(尼羅羅非魚♀

2、×奧利亞羅非魚♂)的生長差異。為羅非魚新雜交種的獲得提供基礎資料。結果如下：1、橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的同工酶電泳分析 　對兩親本羅非魚的5種組織(肝臟、心臟、肌肉、腦和腎臟)中的EST、SOD和LDH三種同工酶進行了初步分析，結果表明三種同工酶均具有明顯的組織特異性。EST在兩種羅非魚的肝臟中表達最強，且?guī)鸵沧顝碗s。兩種羅非魚具有相似的SOD和LDH酶譜，SOD在肌肉中的酶帶條數(shù)最多且多數(shù)酶帶的表達量較高。LDH在腦中

3、豐富表達。同時同工酶的分析結果顯示橙色莫桑比克羅非魚相對荷那龍羅非魚具有多種基因型，可能含有較多可供選擇的等位基因，可用于良種選育。2、橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚群體的遺傳多樣性研究 　運用AFLP分子標記檢測了橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的遺傳多樣性。用篩選出的3對選擴引物組合(E-AGG/M-CTT、E/AGG/M-CAT和E-ACG/M-CTT)在橙色莫桑比克羅非魚種群中分別檢出32、19和23條帶，在荷那龍羅非魚種群中

4、分別檢出35、22和25條帶。橙色莫桑比克羅非魚種群內(nèi)遺傳相似系數(shù)為0.765，荷那龍羅非魚為0.821，說明兩種羅非魚種群內(nèi)遺傳多態(tài)性均較高，但相對而言橙色莫桑比克羅非魚種群內(nèi)遺傳多樣性比荷那龍羅非魚更豐富些，具有更大的選育空間。兩種羅非魚的種間遺傳距離為0.306，表明兩種羅非魚具有一定的遺傳距離，雜交產(chǎn)生的子代可能具有一定的雜種優(yōu)勢。3、橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚及雜交F1的主要生物學、生理學測定3.1 性成熟年齡及懷卵量

5、 橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚最小繁殖年齡均為6個月，屬于多次產(chǎn)卵，其性成熟最小體長分別為6.60cm和8.64cm，最小體重分別為14.077g和37.544g。橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的絕對繁殖力(懷卵量，粒)分別為620～97l和716～983，相對殖力分別為31.233±7.190和17.860±3.1913.2耐鹽性 設置6個鹽度梯度：0、15、25、30、35和40，檢測兩親本羅非魚的耐鹽性。結果表明：橙

6、色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚均屬于耐鹽性較強的魚類。在幾種耐鹽指標中，橙色莫桑比克羅非魚和荷那龍羅非魚的96小時半致死鹽度分別為22.29和21.56；在除鹽度為40外的其它各鹽度中，橙色莫桑比克羅非魚的50％死亡時間和平均死亡時間均高于荷那龍羅非魚，但差異不顯著(p>0.05)。在鹽度馴化試驗中，兩親本羅非魚均能耐受較高鹽度咸水并維持較低死亡率。 3.3耗氧率 用呼吸室法測定橙色莫桑比克羅非魚、荷那龍羅非魚及莫荷魚不

7、同溫度下的耗氧率，結果表明：(1)水溫為16～32℃時，兩親本及莫荷魚的耗氧率范圍分別是，橙色莫桑比克羅非魚(體重18.98～102.53g)0.06～0.43mg/gh，荷那龍羅非魚(體重10.40～116.28g)0.07～0.61m/g.h，莫荷魚(體重2.24～133.82g)0.06～0.65m/g.h。(2)兩親本及莫荷魚的耗氧率存在晝夜變化規(guī)律，耗氧率隨著溫度的升高而增加，同時與試驗魚體重呈負相關。(3)水溫24℃時，兩親

8、本及莫荷魚的溶氧臨界窒息點分別是，橙色莫桑比克羅非魚為0.31～0.45mg／L，荷那龍羅非魚為0.33～0.55mg／L，莫荷魚為0.38～0.43mg／L。 3.4低溫耐受能力 通過人工加冰降溫的方法比較了兩親本及莫荷魚的低溫耐受能力，結果表明：橙色莫桑比克羅非魚、荷那龍羅非魚及莫荷魚的低溫死亡溫度范圍分別是9.9～8.0℃、15.1～9.5℃和11.4～7.5℃；半致死低溫分別為：9.2℃、10.1℃和8.57℃，

9、說明兩親本及雜交F1對低溫的耐受能力均較差。 4、莫荷魚與尼奧魚養(yǎng)殖性能比較 比較莫荷魚與四個不同品系尼羅羅非魚(♀)與奧利亞羅非魚(♂)的雜交F1(尼奧I、尼奧Ⅱ、尼奧Ⅲ、尼奧Ⅳ)的養(yǎng)殖性能，試驗結果表明：(1)絕對增重率(mg/d)：莫荷魚(1.054)>尼奧Ⅱ(0.710)>尼奧Ⅲ(0.666)>尼奧Ⅳ(0.597)>尼奧I(0.579)(p<0.05)；(2)雄性率(％)：莫荷魚(100)>尼奧III(99.3)

10、>尼奧I(88.9)>尼奧II(86.6)>尼奧Ⅳ(85.9)(p<0.05)；(3)肥滿度(K)：莫荷魚(4.183)>尼奧Ⅳ(4.072)>尼奧Ⅲ(3.960)>尼奧Ⅱ(3.906)>尼奧I(3.763)(p<0.01)。養(yǎng)殖生長試驗表明橙色莫桑比克羅非魚♀×荷那龍羅非魚♂的雜交F1養(yǎng)殖性能較好，具有推廣價值。 本研究從蛋白質(zhì)水平和DNA分子水平均發(fā)現(xiàn)，相對而言橙色莫桑比克羅非魚種群的遺傳多樣性更豐富，AFLP分析結果表明兩