廣西羅非魚鰱球菌的分離鑒定、藥敏試驗(yàn)與病理學(xué)研究.pdf

1、羅非魚是我國(guó)重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類，由于其生長(zhǎng)快，食性雜，無肌間刺等優(yōu)點(diǎn)深受養(yǎng)殖戶及消費(fèi)者歡迎。2011年，廣西壯族自治區(qū)羅非魚爆發(fā)鏈球菌病，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失?；疾×_非魚表現(xiàn)為典型的敗血癥，常在池邊漫游，間歇性打轉(zhuǎn)，攝食減少，眼膜發(fā)白，單眼或雙眼突出，甚至脫落，腹部體表具點(diǎn)狀或斑塊出血或潰瘍，鰓蓋內(nèi)側(cè)出血，鰭條基部充血，肝臟、膽囊、脾臟腫大，嚴(yán)重時(shí)糜爛，腹腔有積水。從廣西羅非魚流行病爆發(fā)區(qū)（宜州、柳州、北海）分離獲得5株細(xì)菌，將細(xì)菌對(duì)羅非

2、魚進(jìn)行人工感染試驗(yàn)，感染羅非魚表現(xiàn)出自然發(fā)病癥狀，確認(rèn)分離菌株為羅非魚流行病的致病菌。對(duì)分離株菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、API20 Strep快速鑒定和16S rRNA基因序列分析，結(jié)果表明宜州分離株為海豚鏈球菌（Streptococcus iniae），柳州、北海分離株為無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)。對(duì)各菌株進(jìn)行45種藥物敏感性試驗(yàn)，結(jié)果表明海豚鏈球菌對(duì)哌拉西啉、頭孢拉啶（先鋒Ⅵ）、頭孢孟多等23種藥物較為敏

3、感，不同地區(qū)無乳鏈球菌各菌株之間的藥物敏感性各不相同。所有無乳鏈球菌菌株對(duì)哌拉西啉、頭孢拉啶（先鋒Ⅵ）、頭孢孟多等11種藥物敏感，總體是青霉素類、頭孢菌素類、四環(huán)素類、糖肽類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、利福霉素類、多粘菌素類、酰胺醇類。
　　 通過組織病理學(xué)及超微病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)感染海豚鏈球菌的羅非魚腦、腎臟、脾臟、肝臟、腸、心、骨骼肌和鰓等多個(gè)器官組織發(fā)生不同程度的病變，其中以肝臟、脾臟、腎臟、鰓病理變化最為顯著，主要表現(xiàn)為細(xì)胞局部

4、壞死、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。肝臟發(fā)生水腫變性，壞死，血竇擴(kuò)張充血;胰腺細(xì)胞壞死溶解;脾臟炎細(xì)胞浸潤(rùn)，含鐵血黃素沉積。腎臟小管上皮細(xì)胞水腫，玻璃樣變性，腎間質(zhì)許多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。超微觀察發(fā)現(xiàn)病魚肝細(xì)胞核萎縮，染色質(zhì)邊集于細(xì)胞核內(nèi)膜，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池?cái)U(kuò)張，膜上的核糖體顆粒不同程度散落，線粒體腫大，嵴溶解。脾臟細(xì)胞可見細(xì)菌，細(xì)胞核膜斷裂，溶解，核染色質(zhì)邊集，碎裂。網(wǎng)狀細(xì)胞胞質(zhì)透亮，細(xì)胞器減少，內(nèi)含物減少，呈現(xiàn)水腫狀態(tài)。肌原纖維斷裂錯(cuò)位，排列紊亂，明暗帶模糊。

5、肌絲壞死出現(xiàn)空泡化。心肌原纖維斷裂壞死，線粒體減少，腫脹，溶解，壞死，嵴斷裂，出現(xiàn)髓鞘樣結(jié)構(gòu)。腦小膠質(zhì)細(xì)胞染色質(zhì)溶解邊集，電子密度低，組織中見許多空泡。
　　 在28℃、33℃兩種溫度下，用海豚鏈球菌人工感染尼羅羅非魚后，研究感染后不同時(shí)段尼羅羅非魚血液生化指標(biāo)和組織病理變化。結(jié)果顯示病魚兩個(gè)溫度水平血清總蛋白(TP)隨時(shí)間延長(zhǎng)都呈現(xiàn)升高趨勢(shì);谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性隨時(shí)間延長(zhǎng)先升高后降低再升高，33℃實(shí)驗(yàn)

6、組ALT、AST活性比28℃實(shí)驗(yàn)組達(dá)峰值時(shí)間短，并顯著高于對(duì)照組(P＜0.05);尿素（UREA）、鉀(K+)含量隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高后降低，鈉(Na+)含量先升高后降低再升高，肌酐(CREA)含量呈上升趨勢(shì);28℃實(shí)驗(yàn)組血清堿性磷酸酶(AKP)活性先升高后降低，33℃實(shí)驗(yàn)組呈升高趨勢(shì);超氧化歧化酶(SOD)活性隨時(shí)間延長(zhǎng)先升高后降低再升高，33℃實(shí)驗(yàn)組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)基本高于28℃實(shí)驗(yàn)組;球蛋白(GLO)隨感染后時(shí)間延長(zhǎng)呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，至120