采用SPR傳感器檢測(cè)抗生素等殘留物的改進(jìn)方法與實(shí)驗(yàn).pdf

1、隨著近年來(lái)食品安全事件的發(fā)生,人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注食品安全問(wèn)題。牛奶中抗生素及非法添加劑等的殘留會(huì)對(duì)人體造成危害。然而在牛奶中殘留物檢測(cè)領(lǐng)域,現(xiàn)有方法存在諸多弊端,因此發(fā)展新的檢測(cè)方法勢(shì)在必行。本文采用基于表面等離子體共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)的生物傳感器檢測(cè)牛奶中抗生素和三聚氰胺的殘留,由于SPR生物傳感器在該領(lǐng)域的發(fā)展還不完善,現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)單一,因此,本文主要研究和發(fā)展了新的檢測(cè)方法,豐富了SP

2、R生物傳感器用于抗生素等小分子殘留物的檢測(cè)理論。
　　 ⑴研究了基于SPR生物傳感器的信號(hào)放大策略。在溶液競(jìng)爭(zhēng)法的檢測(cè)基礎(chǔ)上,引入二次抗體進(jìn)行二次檢測(cè),對(duì)信號(hào)進(jìn)行放大,用于提高傳感器檢測(cè)的靈敏度,降低檢測(cè)限。并對(duì)三種殘留物,即氨芐青霉素、卡那霉素、鏈霉素的水溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果表明,利用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè),三種殘留物的最低檢測(cè)限(Limit Of Detection,LOD),分別為1.7ng／mL、25 ng／mL和34 ng／mL

3、,而利用信號(hào)放大法檢測(cè),三種殘留物的最低檢測(cè)限LOD為0.346ng／mL、11.89ng／mL和24.29ng／mL。因此,經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,信號(hào)放大檢測(cè)法的最低檢測(cè)限不僅低于歐盟對(duì)各自的最大殘留檢測(cè)限(Maximum Residue Limit,MRL),而且優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)檢測(cè)法。
　　 ⑵提出了一種利用同一SPR生物傳感器檢測(cè)多種殘留物的新方法。引入分子標(biāo)記技術(shù),采用二次競(jìng)爭(zhēng)將對(duì)待測(cè)物的檢測(cè)轉(zhuǎn)化為對(duì)同一分子標(biāo)記物的檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)一次固

4、定配體對(duì)多種不同結(jié)構(gòu)的殘留物進(jìn)行檢測(cè)。采用牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA),分別對(duì)卡那霉素、三聚氰胺、氨芐青霉素和鏈霉素四種殘留物進(jìn)行分子標(biāo)記,采用同一SPR傳感器對(duì)其水溶液進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明,四種殘留物的檢測(cè)限分別為14.3ng／mL、7.89 ng／mL、0.51 ng／mL和8.08 ng／mL,均低于各自的最大殘留檢測(cè)限。因此,該方法有效的解決了傳感器的專(zhuān)一性問(wèn)題。
　　 ⑶提出了基于S