蜂膠中揮發(fā)性成分的提取方法、化學(xué)組成及生物學(xué)活性.pdf

1、蜂膠是由蜜蜂采集樹脂并混入蜂蠟、花粉及自身腺體分泌物所得到的一種天然產(chǎn)物，具有廣泛的生物學(xué)活性。蜂膠成分復(fù)雜，包含大量的黃酮類化合物、酚酸類化合物及萜類化合物等生物學(xué)活性組分。目前對(duì)蜂膠中的揮發(fā)性成分的組成及生物學(xué)活性研究較少。由于蜂膠生物學(xué)活性的發(fā)揮被認(rèn)為是蜂膠中多種組分共同作用的結(jié)果，因此對(duì)蜂膠揮發(fā)性成分的組成及生物學(xué)活性的研究可為蜂膠生物學(xué)活性的全面評(píng)價(jià)及蜂膠產(chǎn)品的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)。
　　 本研究采用水蒸氣蒸餾法、常溫有機(jī)

2、溶劑提取法、超聲輔助提取法及微波輔助提取法對(duì)蜂膠中的揮發(fā)性成分進(jìn)行了提?。徊捎镁鶆?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)及正交設(shè)計(jì)優(yōu)化了超聲輔助提取及微波輔助提取蜂膠中揮發(fā)性成分的工藝參數(shù)；采用GC-MS對(duì)微波輔助法提取所得的中國蜂膠和巴西蜂膠中揮發(fā)性成分的化學(xué)組成進(jìn)行了分析與比較；采用抑菌圈法及最小抑菌濃度法對(duì)中國蜂膠和巴西蜂膠中揮發(fā)性成分的抑菌活性進(jìn)行了研究；采用DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)、抗氧化能力指數(shù)ORAC測(cè)定實(shí)驗(yàn)及H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞氧化溶血試驗(yàn)評(píng)價(jià)了中國蜂

3、膠和巴西蜂膠中揮發(fā)性成分的體外抗氧化活性；利用束縛所致的小鼠氧化應(yīng)激評(píng)價(jià)了蜂膠揮發(fā)性成分對(duì)機(jī)體氧化應(yīng)激的改善作用；利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了蜂膠揮發(fā)性成分對(duì)類焦慮樣行為的影響。
　　 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：
　　 1、超聲輔助提取及微波輔助提取較適于蜂膠揮發(fā)性成分的提取，揮發(fā)性成分提取得率較高、性狀較好。
　　 2、優(yōu)化的超聲輔助提取蜂膠中揮發(fā)性成分的工藝參數(shù)：提取溫度59℃、料液比1∶15、提取時(shí)間62 min。在此條件下得到

4、中國蜂膠和巴西蜂膠中的揮發(fā)性成分提取率分別為8.70％和8.75％。
　　 3、優(yōu)化的微波輔助提取蜂膠中揮發(fā)性成分的工藝參數(shù)：微波處理溫度為35℃，微波處理15min，料液比為1∶10，提取2次。在此條件下得到中國蜂膠和巴西蜂膠中的揮發(fā)性成分提取率分別為9.73％和11.26％。
　　 4、鑒定出巴西蜂膠揮發(fā)性組分50個(gè)，主要是倍半萜類及其含氧衍生物，長(zhǎng)葉稀、桉葉醇、愈創(chuàng)木醇等。中國蜂膠揮發(fā)性組分47個(gè)，主要是芳香酸及萜

5、類衍生物，肉桂酸、桉葉醇等。兩地蜂膠揮發(fā)性成分中含有21個(gè)具有定香、抑菌、驅(qū)蟲活性的共有組分。
　　 5、中國蜂膠和巴西蜂膠中的揮發(fā)性成分具有抑菌活性，對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌、酵母菌及霉菌抑菌活性強(qiáng)，對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌抑菌活性較弱；中國蜂膠和巴西蜂膠中的揮發(fā)性成分具有DPPH自由基清除作用，其IC50值分別為178.3和309.5μg/ml；ORAC值分別為0.82和0.88μM Trolox eq/g；對(duì)H2O2誘導(dǎo)的兔紅細(xì)胞氧化溶血

6、具有保護(hù)作用，其IC50值分別為0.871和0.879 mg/ml。
　　 6、蜂膠中揮發(fā)性成分可顯著降低束縛應(yīng)激小鼠血清中MDA含量，提高SOD活性；顯著提高肝組織中SOD和CAT的活性，增加肝組織中GSH的含量，降低肝組織中MDA和NO含量，降低XOD活性。
　　 7、蜂膠中揮發(fā)性成分可顯著增加束縛應(yīng)激小鼠在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中進(jìn)入開臂次數(shù)及進(jìn)入開臂時(shí)間百分比，降低防衛(wèi)性探頭及防衛(wèi)性伸展比例，且對(duì)自主活動(dòng)次數(shù)無影響；顯