華北大黃細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及抗氧化活性研究.pdf

1、華北大黃(RheumfranzenbachiiMunt.)為蓼科大黃屬(RheumLinn.)植物，其根及根莖入藥，味苦，性寒，有瀉熱、通便、破積、行瘀的功能，用于治療熱結(jié)便秘、濕熱黃疸、癰腫疔毒、燙火傷等。此外，有抗菌、消炎、收斂、止血等作用。本研究以華北大黃愈傷組織為材料，探討了不同種類(lèi)、不同濃度的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)華北大黃細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的增殖效應(yīng)，并借助高效液相色譜法(HPLC)對(duì)其有效成分——土大黃苷含量進(jìn)行了測(cè)定，采用DPPH自由

2、基清除法研究了不同種樣品醇提物的抗氧化活性，為華北大黃的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.華北大黃細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中，單一生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)其增殖效果不明顯，單一生長(zhǎng)素的增殖效果比單一細(xì)胞分裂素好，與對(duì)照組相比細(xì)胞顯著增長(zhǎng)，幾乎無(wú)褐化現(xiàn)象，其中MS+2，4-D2.0mg/L是單因素的最佳培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)物鮮重為9.43g，增殖3.14倍，干重0.60g，增殖2.00倍。
　　 2.不同濃度6-BA(0.5、1

3、.0、2.0、4.0mg/L)和2，4-D(0.5、1.0、2.0、4.0mg/L)組合，MS+6-BA0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞呈淡黃色，增殖效果最好，鮮重12.05g，增殖4.02倍，干重0.73g，增殖2.43倍。
　　 3.不同濃度的TDZ和NAA組合，不適于華北大黃細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，增殖產(chǎn)生的細(xì)胞部分褐化并且分散性不好。
　　 4.將愈傷組織接種于MS+6-BA2.0mg/L+N

4、AA1.0mg/L液體培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)周期為30d，干重和鮮重生長(zhǎng)曲線(xiàn)為“S”型，并明顯地分為3個(gè)時(shí)期:延遲生長(zhǎng)期、指數(shù)生長(zhǎng)期和靜止期。
　　 5.用HPLC測(cè)定了土大黃苷含量，選取的9種樣品中，3種細(xì)胞培養(yǎng)物（培養(yǎng)基類(lèi)型為MS+TDZ0.5mg/L+NAA0.2mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L)土大黃苷的含量高于野生植株根(4.36mg/g)，其