華北大黃的組織培養(yǎng)及茋類成分研究.pdf

1、華北大黃(Rheum franzenbachii Munt.)為蓼科大黃屬(RheumLinn.)植物,其根及根莖入藥,味苦,性寒,有瀉熱、通便、破積、行瘀的功能,用于治療熱結(jié)便秘、濕熱黃疸、癰腫疔毒、燙火傷等。此外,有抗菌、消炎、收斂、止血等作用。
　　 土大黃苷(rhaponticin)是華北大黃中的一種活性物質(zhì),近年來研究發(fā)現(xiàn)土大黃苷具有降血糖、抗氧化等多種藥理活性。本研究以野生華北大黃為材料,探討了不同種類、不同濃度的植

2、物生長調(diào)節(jié)劑對(duì)華北大黃的愈傷組織誘導(dǎo)效應(yīng)及增殖效應(yīng),并借助高效液相色譜對(duì)其有效成分-土大黃苷含量進(jìn)行了測(cè)定,為華北大黃的進(jìn)一步開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.以野生華北大黃葉片為外植體,用6-BA2.0mg/L與NAA(0.1、0.5、1.0mg/L)組合誘導(dǎo)愈傷組織,愈傷組織誘導(dǎo)率在16.7％～58.3％之間,其中愈傷組織誘導(dǎo)的最佳組合為MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L。
　　 2.

3、培養(yǎng)基中單獨(dú)添加TDZ、KT、6-BA、NAA、2,4-D均不適于愈傷組織的增殖。不同濃度的6-BA(0.5、1.0、2.0、4.0mg/L)和NAA(0.5、1.0、2.0mg/L)組合有利于愈傷組織增殖,其中6-BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L是最佳的鮮重和干重增殖配方,鮮重量達(dá)10.11g/瓶,增殖19倍；愈傷組織干重達(dá)0.64g/瓶,增殖15倍。該培養(yǎng)基作為繼代培養(yǎng)基。
　　 3.0.5、1.0、2.0、4.0m

4、g/L的TDZ、6-BA分別與0.2mg/L的2,4-D、NAA、IAA組合,TDZ0.5mg/L+NAA0.2mg/L是增殖的最佳培養(yǎng)基,鮮重量達(dá)13.15g/瓶,增殖25倍；干重量達(dá)0.60g/瓶,增殖14倍。
　　 4.愈傷組織分別接種于含TDZ0.5mg/L+NAA0.2mg/L和6-BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L的MS培養(yǎng)基中,生長周期為39d,干重和鮮重生長曲線均為“S”型,并明顯地分為三個(gè)時(shí)期:延遲生長期

5、(0～12d)、指數(shù)生長期(鮮重為12～33d、干重為12～30d)和靜止期(鮮重為33～39d、干重為30～39d)。
　　 5.經(jīng)紙層析法鑒定,野生植株和愈傷組織中均含有土大黃苷；用HPLC測(cè)定了土大黃苷含量,選取的6種愈傷組織中有四種(培養(yǎng)基類型分別為TDZ0.5mg/L+NAA0.2 mg/L、6-BA1.0 mg/L+NAA0.2mg/L、TDZ2.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L、6-BA4.0 mg/L+2