無篩選標記glgC重組基因構(gòu)建及馬鈴薯體內(nèi)轉(zhuǎn)化、表達研究.pdf

1、轉(zhuǎn)基因技術(shù)作為一種高尖端的現(xiàn)代生物技術(shù)，在為現(xiàn)代人類社會作出巨大貢獻的同時，其本身也存在著許多問題，生物安全性就是其中最主要的問題之一。目前世界各國都在著手應對轉(zhuǎn)基因動植物所帶來的安全性問題。其中篩選標記基因的去除已經(jīng)成為人們研究的熱點。
　　 在篩選標記基因的去除方法中，應用基因工程的手段，在無篩選標記基因構(gòu)建時，剔除可能帶來不利影響的標記基因，建立無選擇標記植物轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，培育無選擇標記的轉(zhuǎn)基因植物。這個研究無論是從安全性考慮

2、，還是從轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身考慮均有重要意義。
　　 本研究通過構(gòu)建無篩選標記的植物表達載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法成功轉(zhuǎn)化無篩選標記的轉(zhuǎn)基因植株，通過PCR技術(shù)成功篩選出只含目的基因，不含有篩選標記基因的轉(zhuǎn)glgC基因馬鈴薯，獲得無潮霉素篩選標記和無GUS篩選標記的轉(zhuǎn)glgC基因馬鈴薯。研究表明：通過PCR篩選可以獲得無篩選標記轉(zhuǎn)基因馬鈴薯，無篩選標記轉(zhuǎn)基因植株與篩選標記轉(zhuǎn)基因植株表型無差異，其目的基因表達與篩選標記基因無關(guān)。