氟苯尼考在鯉魚(yú)體內(nèi)殘留及對(duì)抗氧化功能的影響.pdf

1、氟苯尼考是一種新型動(dòng)物專(zhuān)用氯霉素類(lèi)藥物，具有抗菌譜廣、毒副作用小、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)，被水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)廣泛應(yīng)用。氟苯尼考的主要代謝產(chǎn)物為氟苯尼考胺，歐盟和中國(guó)以氟苯尼考和氟苯尼考胺共同作為檢測(cè)物。
　　 本研究選取氟苯尼考為研究對(duì)象，采用藥理及毒理學(xué)研究方法，研究其在鯉魚(yú)體內(nèi)的殘留和毒性，為該藥物在鯉魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)中的合理使用提供理論依據(jù)。
　　 建立了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)分析方法，檢測(cè)鯉魚(yú)肌肉和皮膚組織

2、中氟苯尼考和氟苯尼考胺的含量。樣品采用堿性乙酸乙酯提取，純水定容，正己烷脫脂，濃縮后過(guò)ACQUIT UPLC BEH-C18色譜柱分離，柱溫：40℃，進(jìn)樣體積：10μL，流速：0.25 mL/min，乙腈和水為流動(dòng)相梯度洗脫，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)。結(jié)果顯示，在10～1000ng/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，氟苯尼考和氟苯尼考胺標(biāo)準(zhǔn)品線(xiàn)性關(guān)系良好(r=0.999)，氟苯尼考在肌肉和皮膚中的平均回收率分別為90.11％和92.37%，氟苯尼考胺在肌

3、肉和皮膚中的平均回收率分別為86.40%和91.79%，最低檢測(cè)分別為0.1 ng/mL和0.5 ng/mL。日內(nèi)和日間平均變異系數(shù)均在15%以?xún)?nèi)，滿(mǎn)足氟苯尼考和氟苯尼考胺藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究要求。
　　 實(shí)驗(yàn)水溫(18±1)℃下的鯉魚(yú)按15 mg/kg體重的劑量口灌給藥，每24 h給藥一次，連續(xù)給藥3次，分別在給藥后0.5 h，1h，2h，4h，8h，12 h，24 h，2d，3d，5d，7d，10 d，15 d，20 d取肌

4、肉和皮膚，用所建立的液-質(zhì)聯(lián)用法分析氟苯尼考和氟苯尼考胺的殘留消除規(guī)律，所得結(jié)果顯示：在最后一次給藥后的2d時(shí)，氟苯尼考和氟苯尼考胺二者的和在肌肉和皮膚中均小于1μg/g，符合我國(guó)MRLS標(biāo)準(zhǔn)，在最后一次給藥后的10 d時(shí)，氟苯尼考和氟苯尼考胺二者的和在肌肉和皮膚中均小于0.2μg/9，符合日本MRLS標(biāo)準(zhǔn)。
　　 實(shí)驗(yàn)以15 mg/kg、30 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg的劑量連續(xù)口灌鯉魚(yú)20 d，分別在給

5、藥期間的第4d、10 d、15 d、20 d以及實(shí)驗(yàn)的第30 d檢測(cè)血漿和肝臟中的ALT、AST、SOD、MDA、T-AOC、GSH-PX的活性，以及肝臟中CAT的活性，血漿中BUN的活性。
　　 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第15 d，100 mg/kg劑量組血漿中和肝臟中ALT的活性顯著高于對(duì)照組，肝臟中100 mg/kg劑量組中SOD、CAT活性明顯高于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)第20 d，100 mg/kg劑量組肝臟中ALT和SOD的活性顯著下降，血漿

6、中50 mg/kg劑量組ALT、100 mg/kg劑量組BUN活性以及肝臟中100 mg/kg劑量組MDA、GSH-PX活性顯著高于對(duì)照組，其余各實(shí)驗(yàn)組活性雖有升高，但無(wú)顯著差異。
　　 實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)受試魚(yú)血漿和肝臟中的AST活性升高，T-AOC的活性降低，鰓中NA+K+-ATP活性有所降低，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異性。
　　 綜上所述：氟苯尼考對(duì)鯉魚(yú)毒副作用很小，休藥期按我國(guó)MRLS標(biāo)準(zhǔn)為2d，按日本MRLS標(biāo)準(zhǔn)為10