酵母培養(yǎng)物對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬腸道微生物發(fā)酵和區(qū)系及機(jī)體免疫功能的影響.pdf

1、蘇南地區(qū)夏季的高溫高濕環(huán)境對(duì)生長(zhǎng)育肥豬的健康生長(zhǎng)是一個(gè)很大的挑戰(zhàn)，可能破壞胃腸道內(nèi)正常微生物菌群的代謝平衡，并導(dǎo)致消化吸收和免疫系統(tǒng)出現(xiàn)某些功能性障礙。酵母培養(yǎng)物（Yeast Cultures，簡(jiǎn)稱(chēng)YC）是酵母細(xì)胞、發(fā)酵后培養(yǎng)基和酵母細(xì)胞代謝產(chǎn)物的混合物。YC含有的寡糖類(lèi)、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、維生素、酵母來(lái)源的酶和其他未知生長(zhǎng)因子能夠作為腸道正常有益菌的主要底物.因此YC有可能調(diào)節(jié)胃腸道中微生態(tài)平衡，在一定程度上刺激機(jī)體的免疫

2、反應(yīng)。本試驗(yàn)旨在探討YC對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬腸道微生物發(fā)酵能力、微生物區(qū)系及相關(guān)免疫功能的影響。試驗(yàn)分為三部分:
　　 一酵母培養(yǎng)物對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬回腸及結(jié)腸微生物發(fā)酵能力的影響
　　 豬腸道微生物發(fā)酵產(chǎn)生的VFA能被腸壁迅速吸收或利用，因此食糜VFA的水平可能不能準(zhǔn)確評(píng)價(jià)VFA的產(chǎn)量。本試驗(yàn)因此分別設(shè)計(jì)在體動(dòng)物試驗(yàn)和兩個(gè)批次的體外發(fā)酵試驗(yàn)來(lái)研究日糧中添加酵母培養(yǎng)物(Yeast Culture，YC)對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬腸道微生

3、物發(fā)酵能力的影響.體內(nèi)試驗(yàn)選用180頭、70日齡、平均體重29.56±1.12kg的杜×長(zhǎng)×大三元雜交商品豬，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭豬，對(duì)照組（C組）飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1(T1)和試驗(yàn)2(T2)組則在基礎(chǔ)日糧中分別添加1 g/kg· DM和4g/kg·DM的YC。試驗(yàn)期共95天，分生長(zhǎng)期(30kg～60kg)和育肥期(60kg～100 kg).分別在生長(zhǎng)期末和育肥期末各組各重復(fù)隨機(jī)選取1頭豬進(jìn)行屠宰取樣，

4、采集回腸和結(jié)腸食糜，分別用氣相色譜法和比色法測(cè)定食糜的揮發(fā)性脂肪酸（Volatile Fatty Acids，VFA）和乳酸濃度。體外試驗(yàn)中，以上述回腸食糜為底物、結(jié)腸食糜為接種物，來(lái)模擬回腸食糜進(jìn)入結(jié)腸后被微生物發(fā)酵產(chǎn)VFA的情況.試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下:(1)相同底物（C組回腸食糜）、不同接種物（C、T1、T2組結(jié)腸食糜）組合，以反映YC對(duì)結(jié)腸微生物發(fā)酵能力的影響;(2)不同底物（C、T1、T2組回腸食糜）、相同接種物（C組結(jié)腸食糜）組合，以

5、反映YC對(duì)回腸食糜可發(fā)酵能力的影響;(3)對(duì)應(yīng)底物（C、T1、T2組回腸食糜）和對(duì)應(yīng)接種物（C、T1、T2組結(jié)腸食糜），以綜合反映YC對(duì)腸道微生物發(fā)酵能力的影響.37℃下發(fā)酵24h后，測(cè)定VFA和乳酸濃度。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明:日糧添加YC可在一定程度上改變回腸微生物的發(fā)酵產(chǎn)物組成，生長(zhǎng)期T2組回腸食糜丙酸濃度顯著高于T1組(P＜0.05)，T2組丁酸濃度顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，T1組回腸食糜乳酸濃度顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），

6、T2組回腸食糜的乳酸濃度極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01);育肥期T1組回腸食糜乳酸濃度顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。YC對(duì)結(jié)腸食糜乳酸和VFA濃度沒(méi)有影響。體外發(fā)酵試驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn):①YC有提高結(jié)腸微生物發(fā)酵回腸食糜產(chǎn)VFA能力的趨勢(shì)，生長(zhǎng)期C-T1組產(chǎn)生的丁酸濃度顯著高于C-C組(P＜0.05);育肥期試驗(yàn)組結(jié)腸微生物的發(fā)酵能力與對(duì)照組相比有升高趨勢(shì)，但差異不顯著(P＞0.05)。②YC顯著提高了回腸食糜的可發(fā)酵性，生長(zhǎng)期T1-C組T

7、VFA濃度及其各組分均顯著高于C-C組（P＜0.01）;T2-C組乙酸、丁酸和總VFA濃度均顯著高于C-C組(P＜0.01);育肥期T1-C和T2-C組TVFA、乙、丙和丁酸濃度較對(duì)照組有升高趨勢(shì)，但差異不顯著（P＞0.05）.③從整體看YC顯著提高了生長(zhǎng)期腸道微生物產(chǎn)丁酸的能力（P＜0.01），但對(duì)生長(zhǎng)期TVFA和乙、丙酸濃度，及育肥期TVFA和各組成酸的濃度無(wú)顯著影響(P＞0.05)。綜合以上試驗(yàn)結(jié)果:在夏季生長(zhǎng)育肥豬日糧中添加YC

8、能顯著降低回腸乳酸濃度;同時(shí)顯著增強(qiáng)腸道微生物發(fā)酵產(chǎn)VFA的能力，尤其是產(chǎn)生丁酸的能力，從而有助于緩解持續(xù)高溫高濕環(huán)境對(duì)腸道微生態(tài)平衡的破壞。
　　 二酵母培養(yǎng)物對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬回腸及結(jié)腸微生物區(qū)系的影響
　　 本試驗(yàn)以研究酵母培養(yǎng)物(YC)對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬腸道微生物區(qū)系結(jié)構(gòu)和優(yōu)勢(shì)菌數(shù)量的影響為目的。試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組、動(dòng)物屠宰和回、結(jié)腸食糜樣品采集同試驗(yàn)一的在體試驗(yàn)。利用基于16S rRNA基因的PCR/DGGE技術(shù)探討回

9、、結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)的變化，Real-time PCR技術(shù)測(cè)定回、結(jié)腸食糜總菌和乳酸桿菌數(shù)量，半定量PCR測(cè)定結(jié)腸丁酸產(chǎn)生菌的數(shù)量。結(jié)果表明，YC一定程度上改變了回、結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)，添加YC組菌群相似性更高。YC對(duì)生長(zhǎng)育肥豬回、結(jié)腸食糜總菌數(shù)量沒(méi)有影響，試驗(yàn)組生長(zhǎng)育肥豬回腸食糜中乳酸桿菌的數(shù)量較對(duì)照組顯著降低(P＜0.05)，而各組結(jié)腸食糜乳酸桿菌數(shù)量沒(méi)有顯著差異。YC提高了結(jié)腸丁酸產(chǎn)生菌的數(shù)量，但差異不顯著(P＞0.05)。由此可見(jiàn)，夏季生長(zhǎng)

10、育肥豬日糧中添加YC，能夠提高回腸和結(jié)腸菌群結(jié)構(gòu)相似性，顯著降低回腸乳酸桿菌的數(shù)量，在一定程度上提高結(jié)腸丁酸產(chǎn)生菌數(shù)量，與體外發(fā)酵試驗(yàn)中YC降低回腸乳酸濃度，提高丁酸濃度的結(jié)果相一致，因而有利于菌群結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，以緩解持續(xù)高溫高濕環(huán)境對(duì)腸道微生態(tài)平衡的破壞。
　　 三酵母培養(yǎng)物對(duì)夏季生長(zhǎng)育肥豬機(jī)體免疫功能的影響
　　 本試驗(yàn)旨在探討夏季日糧中添加酵母培養(yǎng)物對(duì)生長(zhǎng)育肥豬免疫機(jī)能相關(guān)指標(biāo)的影響。試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)同試驗(yàn)一。生長(zhǎng)

11、和育肥期末，從每欄中分別隨機(jī)選取一頭豬屠宰，稱(chēng)胸腺、脾臟和肝臟重量，計(jì)算免疫器官指數(shù);采血并分離血清，用于測(cè)定IL-4、IFN-γ和PRRS抗體滴度;采集空腸組織和脾臟，勻漿后分別用于測(cè)定空腸SIgA、IL-4和IFN-γ濃度，及脾臟的IL-4和IFN-γ濃度。結(jié)果表明，生長(zhǎng)期T2組空腸IFN-γ濃度較T1組顯著降低（P＜0.05）;T1組和T2組血清IFN-γ濃度均極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01);T2組空腸IL-4濃度較對(duì)照組有降低

12、趨勢(shì)(P=0.07); T2組脾臟IL-4濃度顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）;T1組和T2組血清IL-4濃度較對(duì)照組有升高趨勢(shì)（P=0.05）。育肥期T2組肝臟指數(shù)較比對(duì)照組顯著降低（P＜0.05）;T1組脾臟IFN-γ濃度顯著低于對(duì)照組(P＜0.05），T2組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01);T1組和T2組血清IL-4濃度均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。以上結(jié)果表明，夏季生長(zhǎng)育肥豬日糧中添加YC，在一定程度上增強(qiáng)了機(jī)體體液免疫和細(xì)胞