金屬離子對(duì)馬氏珠母貝珍珠層顏色和金屬硫蛋白基因表達(dá)的影響.pdf

1、馬氏珠母貝(Pinctada martensii)主要分布于日本、印度、印尼和我國南部沿海，是生產(chǎn)中小規(guī)格海水珍珠的主要貝種，在我國廣東、廣西和海南沿海有較大規(guī)模的人工養(yǎng)殖。本文通過在餌料和養(yǎng)殖水體中添加特定的金屬離子，貝體富集一定時(shí)間后，測定珍珠層中富集離子和顏色的差異，分析不同金屬離子富集后的分布及對(duì)珍珠層顏色的影響；同時(shí)應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)分析富集金屬離子對(duì)外套膜中金屬硫蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果表明：
　　1.不同殼色貝殼中金

2、屬離子含量有差異。從本實(shí)驗(yàn)室的馬氏珠母貝黑色，紅色，白色和金黃色選育群體中挑選殼色鮮明的個(gè)體，將貝殼洗凈烘干后粉碎制樣，ICP-MS分析。四種殼色測試14種元素，Mn、Zn、Cu、Cd四種離子在不同殼色間含量有顯著差異(P<0.05)：黃色貝殼Mn>白色貝殼；黑色貝殼Cu>白色貝殼，Cd>其它三種顏色貝殼；紅色貝殼Zn>其他三種顏色貝殼。
　　2.Cu、Zn、Cd、Mn四種金屬離子對(duì)馬氏珠母貝速長系的急性毒性實(shí)驗(yàn)顯示：96h半致死

3、濃度依次為0.16mg/L、4.42mg/L、5.3mg/L、244mg/L，計(jì)算獲得的安全濃度分別為0.016mg/L、0.442mg/L、0.53mg/L、24.4mg/L，據(jù)此推斷四種金屬離子毒性強(qiáng)度大小依次為Cu2+>Zn2+>Cd2+>Mn2+。
　　3.小球藻對(duì)4種金屬離子的富集實(shí)驗(yàn)顯示：Cu2+、Zn2+、Cd2+、Mn2+四種離子達(dá)到富集平衡時(shí)吸附率分別為：80％、85％、55％、79％，吸附系數(shù)分別是1391、1

4、000、245、686。
　　4.采用富集重金屬的小球藻投喂(記為實(shí)驗(yàn)組Ⅰ-Cu、Ⅰ-Zn、Ⅰ-Mn和Ⅰ-Cd)和在養(yǎng)殖水體中添加金屬離子(記為實(shí)驗(yàn)組Ⅱ-Cu、Ⅱ-Zn、Ⅱ-Mn和Ⅱ-Cd)兩種方式進(jìn)行馬氏珠母貝富集實(shí)驗(yàn)。測定珍珠層離子含量發(fā)現(xiàn)：實(shí)驗(yàn)組金屬離子含量比對(duì)照組有所增加，但無顯著性差異(P>0.05)。用色差儀測量貝殼外緣珍珠層顏色參數(shù)，結(jié)果表明：顏色參數(shù)L均為55左右，a值均在紅色范圍，b值均在藍(lán)色范圍。除Ⅰ-Mn-B

5、lack，Ⅱ-Cu-Black和Ⅱ-Cu-Ⅰ-Mn以外，其他實(shí)驗(yàn)組間色差值均在1.5以上，屬于明顯色差。
　　5.從本課題組轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中篩選得到編碼金屬硫蛋白的unigene，其長度為265bp，編碼85個(gè)氨基酸。在安全濃度下，Cu、Zn、Mn和Cd四種離子誘導(dǎo)外套膜金屬硫蛋白的表達(dá)情況顯示：Cu離子誘導(dǎo)的表達(dá)量呈遞增趨勢，10天時(shí)達(dá)到最大值，之后逐漸降低，到第20天時(shí)，表達(dá)基本恢復(fù)至原有水平；鋅離子誘導(dǎo)的表達(dá)變化趨勢與銅離子的基