生物絮團(tuán)中細(xì)菌的分離鑒定及其特性研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)從生物絮團(tuán)中分離細(xì)菌，對(duì)其特性進(jìn)行了研究；驗(yàn)證了細(xì)菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦的安全性；并利用篩選出的細(xì)菌培養(yǎng)生物絮團(tuán)。主要研究結(jié)果如下：
　　1、生物絮團(tuán)中異養(yǎng)亞硝化菌的分離鑒定及其特性研究
　　采用富集培養(yǎng)、分離純化等微生物學(xué)手段，從對(duì)蝦養(yǎng)殖池的生物絮團(tuán)中篩選出兩株對(duì)氨氮具有高轉(zhuǎn)化率的菌株。16S rDNA測(cè)序及系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果表明兩株菌均屬于鹽單胞菌屬，菌株2011072708與食物鹽單胞菌（Halomonas aliment

2、aria）有99％的同源性，而菌株2011072709與勝利鹽單胞菌（H.shengliensis）有100%的同源性。比較研究了兩株菌在不同溫度、鹽度、pH、碳氮比條件下對(duì)氨氮的轉(zhuǎn)化率，菌株2011072708在溫度37℃、鹽度30-40、pH8、碳氮比28的條件下對(duì)氨氮的轉(zhuǎn)化率最高；菌株2011072709在溫度27℃-42℃、鹽度40-50、pH6、碳氮比21的條件下對(duì)氨氮的轉(zhuǎn)化率最高。研究結(jié)果表明勝利鹽單胞菌（201107270

3、9）對(duì)溫度、鹽度、pH、碳氮比等各方面的適應(yīng)性?xún)?yōu)于食物鹽單胞菌（2011072708），更合適在生物絮團(tuán)技術(shù)中得到應(yīng)用。
　　2、生物絮團(tuán)中一株硝化細(xì)菌的篩選鑒定及其特性的研究
　　從對(duì)蝦生物絮團(tuán)養(yǎng)殖池中分離出一株對(duì)亞硝酸鹽具有高效轉(zhuǎn)化能力的優(yōu)良菌株，根據(jù)16S rDNA序列分析結(jié)果，初步確定為鹽單胞菌屬，與Halomonasvenusta在16S rDNA水平上有99%的高相似性。研究了碳氮比、初始pH、鹽度、溫度四個(gè)因素

4、對(duì)菌株2011072701轉(zhuǎn)化亞硝酸鹽的影響，確定了最適條件。結(jié)果表明，該菌株在碳氮比15、初始pH8-10、鹽度30-40、溫度37℃對(duì)亞硝酸鹽轉(zhuǎn)化效率最高，其最高轉(zhuǎn)化率為91.69%。本研究從對(duì)蝦生物絮團(tuán)養(yǎng)殖池中篩選出一株亞硝酸鹽轉(zhuǎn)化菌，在進(jìn)一步豐富亞硝酸鹽利用菌種質(zhì)資源的同時(shí)為該菌株在生物絮團(tuán)養(yǎng)殖技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　3、生物絮團(tuán)中3株有益菌的篩選鑒定及初步研究
　　采用拮抗試驗(yàn)的方法從對(duì)蝦養(yǎng)殖池的生物絮團(tuán)

5、中篩選出三株對(duì)對(duì)蝦病原菌（鰻弧菌、副溶血弧菌、哈維氏弧菌）有拮抗作用的細(xì)菌，經(jīng)16S rDNA測(cè)序及系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果表明菌株2011072701與鹽單胞菌（Halomonas sp.）有99%的同源性，菌株2011072709與勝利鹽單胞菌（H. shengliensis）有100%的同源性，菌株2012052503與巨大芽孢桿菌有（Bacillusmegaterium）有99%的同源性。溶血試驗(yàn)證實(shí)這三株菌不產(chǎn)生溶血素，不具有潛在的致

6、病性；藥敏試驗(yàn)表明菌株2011072701和2011072709對(duì)其中10中抗生素表現(xiàn)為耐藥，而菌株2012052503只對(duì)青霉素耐藥，對(duì)其余19種抗生素表現(xiàn)為敏感；動(dòng)物安全性實(shí)驗(yàn)表明菌株濃度在107CFU/mL以下時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)蝦無(wú)明顯的毒害作用。因此，三株菌可以在生產(chǎn)上應(yīng)用。
　　4、添加細(xì)菌和蔗糖對(duì)生物絮團(tuán)生成量影響的初步研究
　　為了研究添加細(xì)菌對(duì)生物絮團(tuán)生成量的影響，將3株不同的細(xì)菌加入到凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體中，并添加蔗