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1、枳(Poncirustrifoliata(L.)Raf)是研究耐低溫基因較為理想的材料。本研究是以實(shí)驗(yàn)室通過(guò)SSH(Suppressionsubtractivehybridization)篩選的一個(gè)低溫響應(yīng)基因PtrPRP為研究對(duì)象,對(duì)其抗寒方面的功能進(jìn)行研究。本研究分析該基因在不同脅迫條件下的表達(dá)模式,并通過(guò)農(nóng)菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將PtrPRP-RNAi轉(zhuǎn)入枳來(lái)研究其抗寒功能。主要研究結(jié)果如下:
1、PtrPRP基因在低溫、
2、干旱、外源ABA以及鹽脅迫處理不同時(shí)間下的表達(dá)分析表明,PtrPRP能夠被上述4種處理誘導(dǎo)表達(dá),但不同處理下的表達(dá)水平有所不同,其中尤以低溫最為顯著。此外,分析表明PtrPRP在葉中的表達(dá)量最高,在根中的表達(dá)量最低。通過(guò)亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)及分析,發(fā)現(xiàn)PtrPRP定位在細(xì)胞膜上。
2、通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)將PtrPRP-RNAi轉(zhuǎn)入枳中,PCR共鑒定出陽(yáng)性植株31株。選取其中的6個(gè)系和WT進(jìn)行半定量分析,發(fā)現(xiàn)在51#、52#和54#中Pt
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