白樺成花計時基因的研究.pdf

1、東北林業(yè)大學碩士學位論文白樺成花計時基因的研究姓名：魏志剛申請學位級別：碩士專業(yè)：林木遺傳育種指導教師：楊傳平;姜靜2002.5.1A b s t r a c tT h i sr e s e a r c h i s c o n c e r n e dt o c l o n et h e f l o w e r —t i m i n g g e n e so fB e t u l ap l a t y p h a l l au n d e

2、 rt i l e i n t e n s i v ec o n d i t i o nb yo r t h o l o g u sg e n ec l o n i n gt e c h n i q u e ．T h ep u r p o s ei s t or e v e a l1 h e c o n t r o l m e c h a n i s m o fe a r l y f l o w e r i n gg e n e s o

3、 ft h i s s p e c i e s ，a n d a l s o t o a n a l y z e s o m es p e c i a lg e n e ’se x p r e s s i o ni nt h a tc o n d i t i o n ．1 ' h e b e s tt i m et oc o l l e c tt h em a t e r i a l sf o rc l o n i n gi s

4、 d i s c u s s e di n t h i sp a p e r , w h i c hi s f r o mt h ee n do fM a yt o t h e b e g i n n i n go fJ u n ee a c hy e a r ．I t m e a n st h e r ei s o n l y a w e e kf o rt h em a t e r i a l st ot r a n s i tf

5、r o ma p e xd i v i d i n gt i s s u et o f l o w e ri n f l o r e s c e n c e ，b u ts t i l l a l i t t l e c h a n g e、~ i t h t e m p e r a t u r e e v e r yy e a r ．S i n c e t h e r e a r e m o r e t h i n g s i n t

6、 h e b u d t i s s u e o ft h e m a l e f l o w e r , s u c h a s p h e n o l i cc o m p o u n d s ，p o l y s a c c h r i d e s ，p r o t e i n sa n d s o m eo t h e r s e c o n d a r ym e t a b o l i t e s ，t h r e e m e

7、 t h o d su s e dt oi s o l a t eR N A a r et e s t e di n t h i sa s s a y ，w h i c ha r e t h ee n z y m e d i g e s t i n gm e t h o d s o f C T A B ，C T A B —D N Aa n dS D S —D N A A tl a s t ，C T A B —D N A a n dS D

8、 S —D N Am e t h o d sa r e u s e di n t h i se x p e r i m e n t ，O nt h e b a s i so f o p t i m i z i n ge x p e r i m e n tp r o c e d u r ea n dP C R s y s t e mo ft h e m a t e r i a l s ，t h ei n i t i a l r e v e

9、 r s i o nt r a n s c r i p t i o ns y s t e m a n d o r t h o l o g u sg e n e c l o n i n g t e c h n i q u ea r ee s t a b l i s h e dS e v e np a i r so fd e g e n e r a c yp r i m e r sf o rc l o n i n ga r es c h e

10、 m e d o u tb yu s i n gB i o i n f o r m a t i c ss o f t w a r e ．A f t e rs e l e c t i o n ，o n ep a i ro f p r i m e r0 “ 4 01 ：P S5 “ - - A R A A R G C N C A Y G A R A T ，P A 5 、R C A T C C A N G G N G G C A T 、i S

11、 u s e d t od oP C R a m p l i f i c a t i o n i nt h ee x p e r i m e n tT h r e es p e c i a lb a n d s a sP C R p r o d u c t s ，o b t a i n e db yu s i n gp r i m e rN o ．1 ，a r er e c l a i m e d ，a n dt h e n u s e

12、 d t o c l o n i n g a n d s e q u e n c i n g T h r o u g h h o m o l o g o u s c o m p a r i s o n w i t h d a t a f r o mI n t e r n a t i o n a lN u c l e o t i d eD a t a b a n k ．t h eb a n d ’Sf u n c t i o n sh a

13、 v eb e e ns i m p l ya n a l y z e d I t s h o w st h a tt h e l o n g e s tb a n d ( 6 7 5 b p ) h a sl o w e rh o m o l o g yw i t hf l o w e r - t i m i n gg e n e s ，b u tt h e r e i s 8 0p e r c e n t a g eo f h o

14、m o l o g yw i t hp e c t i n e s t e r a s ed u r i n gC i t r u sd e v e l o p m e n t ，i n 18 4s c o r eo f H S P ．I ti s c l e a r t o s e e a f u n c t i o n a l d o m a i n b ym o d e l i n gt h r e e —d i m e n s

15、i o n s t r u c t u r e o ft h e p r o t e i nH e r e b y , i tm a yp r o b a b l yc o n c e r nt h i s b a n da s a p a r t i a ls e g m e n to fp e c t i n e s t e r a s eo fB e t u l ap l a t y p h a l l a ．T h eo t h

16、 e rs t u d yw i l lb ed o n ei nt h ef u t u r e ．K e y w o r d s ：B e t u l ap l a t y p h a l l a ，f l o w e r g e n e ，f l o w e r - t i m i n g g e n e ，o r t h o l o g u s g e n e c l o n e ，B j o i n f o r m a t i