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1、華中師范大學(xué)碩士學(xué)位論文Ca結(jié)合區(qū)域關(guān)鍵氨基酸對人細(xì)小病毒B19磷脂酶A2活性影響的研究姓名:馮志鴻申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:李毅20100501⑨碩士學(xué)位論文MASTER’STHESIS22514291bp的基因序列克隆到pBluescriptIIKS()上,構(gòu)建的重組質(zhì)粒PB2040作為突變PCR的模板,用相應(yīng)的突變引物通過體外快速突變法進(jìn)行突變,篩選突變克隆并測序正確后,將突變以后的2040bp片段克隆到缺失204
2、0bp片段的B19—4244質(zhì)粒上,從而構(gòu)建好相應(yīng)的突變克隆B194244m。本實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成功構(gòu)建了pB2040,并且通過PCRSDM獲得了132、134和154位氨基酸的突變體pBGl32R、pBGl34R,pBDl54A,為突變感染性克隆的構(gòu)建提供一個(gè)中間體。這些結(jié)果為進(jìn)一步研究VPl獨(dú)特區(qū)的功能提供了基本的分子生物學(xué)工具,為闡明B19病毒的感染機(jī)制提供了一定的理論基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:人類細(xì)小病毒B19;VPl獨(dú)特區(qū);磷脂酶A2活性;突變感
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