27162.myostatin在早期胚胎骨骼肌發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)與可能功能

1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10023學(xué)號(hào)：b2006231Myostatin在早期胚胎骨骼肌發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)與可能功能所院：姓名：指導(dǎo)教師：學(xué)科專(zhuān)業(yè)：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院周玉長(zhǎng)朱大海教授生物化學(xué)與分子生物學(xué)骨骼肌早期發(fā)育2010年6月摘要Myostatin作為T(mén)GF13超家族成員之一，在骨骼肌生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起著十分重要的作用。Myostatin基因敲除小鼠骨骼肌體積的大小是相應(yīng)野生型小鼠骨骼肌的2～3倍。其骨骼肌增大是

2、肌纖維增生和肥大共同作用的結(jié)果，Myostatin基因敲除小鼠脛骨前肌肌纖維的數(shù)量比相應(yīng)野生型小鼠多86％。而Myostatin基因自然突變的“雙肌“牛，骨骼肌的增大主要是肌纖維增生。在脊椎動(dòng)物除魚(yú)類(lèi)以外，成年動(dòng)物中骨骼肌纖維的數(shù)量主要由胚胎期和胎兒期形成的骨骼肌纖維數(shù)量決定。出生后骨骼肌的發(fā)生主要由位于肌膜和基底膜之間的衛(wèi)星細(xì)胞激活、增殖和分化，最后與胚胎期和胎兒期形成的肌纖維融合使骨骼肌纖維增大。Myostatin基因敲除小鼠和“雙

3、肌牛’’骨骼肌纖維增多，提示Myostatin在骨骼肌發(fā)生的過(guò)程中就起著非常重要的作用。但到目前為止，對(duì)Myostatin在早期骨骼肌發(fā)育中的作用了解還沒(méi)有任何直接的報(bào)道。為了探討Myostatin在早期骨骼肌生畏發(fā)育中的作用，本研究用雞胚作為模式生物，通過(guò)整胚原位雜交和RTPCR的方法對(duì)雞胚早期骨骼肌發(fā)生過(guò)程中Myostatin的表達(dá)模式進(jìn)行了系統(tǒng)分析。結(jié)果顯示，用RTPCR的方法最早可以在HHl5的雞胚檢測(cè)到Myostatin的表達(dá)

4、。用整胚原位雜交的方法最早可以檢測(cè)到Myostatin在HHl6的雞胚最前面的枕部體節(jié)中表達(dá)。隨著發(fā)育的進(jìn)程，Myostatin的表達(dá)從前面的體節(jié)往后面的體節(jié)延伸；到HHl9的雞胚中，Myostatin在雞胚肢芽間體節(jié)的中央表達(dá)；到HH23～HH24的雞胚幾乎所有體節(jié)中均可以檢測(cè)到Myostatin的表達(dá)。在特定的體節(jié)中Myostatin先從體節(jié)生皮肌節(jié)的中央開(kāi)始表達(dá)；隨著體節(jié)進(jìn)一步分化，Myostatin的表達(dá)區(qū)域從生皮肌節(jié)的中央向生

5、皮肌節(jié)背中唇、腹側(cè)唇和肌節(jié)方向延伸。Myostatin從HHl7開(kāi)始在舌下索中表達(dá)，隨著發(fā)育進(jìn)程這種表達(dá)信號(hào)更強(qiáng)，從發(fā)育階段HH23的雞胚開(kāi)始，Myostatin在將來(lái)形成舌骨骼肌區(qū)域表達(dá)信號(hào)開(kāi)始減弱。在肢芽發(fā)育過(guò)程中，Myostatin最早在HH21的雞胚前后肢芽的近端中央部分表達(dá)；在隨后的發(fā)育過(guò)程中，Myostatin在肢芽中的表達(dá)從近端往肢芽的遠(yuǎn)端延伸；有趣的是Myostatin在早期胚胎肢芽中的表達(dá)并不只是局限在形成骨骼肌的背側(cè)