大豆凝集素的檢測(cè)、純化和對(duì)大鼠抗?fàn)I養(yǎng)機(jī)理的研究.pdf

1、該論文研究了大豆凝集素的檢測(cè)、純化及其對(duì)大鼠的抗?fàn)I養(yǎng)機(jī)理,共包括四個(gè)部分.首先,通過(guò)自制兔抗大豆凝集素抗體,建立了大豆凝集素的間接抑制ELISA測(cè)定方法,并對(duì)幾種不同品種生大豆中的凝集素含量進(jìn)行了測(cè)定.其次,比較了N-乙?；?D-半乳糖胺-expoxy-Sepharose 6B親和層析體系和半乳糖胺-CH-Sepharose 4B親和層析體系制備的大豆凝集素純度和凝集活性,并采用前者進(jìn)行大豆凝集素的制備.接著,在上述工作的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)兩

2、個(gè)氮平衡試驗(yàn)來(lái)研究大豆凝集素對(duì)大鼠氮代謝的影響.兩個(gè)試驗(yàn)均選取24只19日齡斷奶的Sprague-Dawley雄性大鼠,隨機(jī)分配到四個(gè)日糧處理中.采用玉米淀粉+酪蛋白基礎(chǔ)日糧,采食量7g/只/d,試驗(yàn)期均為10d.在第一個(gè)氮平衡試驗(yàn)中,試驗(yàn)大鼠初始體重73.5±1.8g.四個(gè)處理日糧中大豆凝集素水平分別為0、0.1、0.2或0.4mg/g.第二個(gè)氮平衡試驗(yàn)是在第一個(gè)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,提高了日糧中大豆凝集素的含量,分別為0、0.4、0.6或0

3、.8mg/g,試驗(yàn)大鼠初始體重81.5±2.5g.最后,在氮平衡試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)加大凝集素劑量和延長(zhǎng)試驗(yàn)期,研究了大豆凝集素對(duì)大鼠生長(zhǎng)、器官增生以及血漿胰島素和膽囊收縮素水平的影響.試驗(yàn)選用30只19日齡斷奶的Sprague-Dawley(SD)大鼠,初始體重74.5±2.3g,隨機(jī)分為5個(gè)處理,試驗(yàn)期20d.5個(gè)處理分別飼喂玉米淀粉+酪蛋白基礎(chǔ)日糧(對(duì)照),或每g基礎(chǔ)日糧分別添加0.4,0.8,1.2或2.0mg的純化大豆凝集素,采

4、食量7g/只/d.該研究建立的間接抑制ELISA方法檢測(cè)大豆制品中的凝集素含量時(shí)檢測(cè)下限低于10ng/mL提取液,可以用于檢測(cè)生大豆及其加工產(chǎn)品中的凝集素含量.采用N-乙酰基-D-半乳糖胺-expoxy-Sepharose 6B親和層析體系制備的大豆凝集素在純度、凝集活性等方面都高于半乳糖胺-CH-Sepharose 4B親和層析體系制備的大豆凝集素.日糧中添加大豆凝集素使大鼠糞氮和尿氮的排出增加(P<0.05),氮表觀(guān)消化率和氮存留率

5、降低(P<0.05).日糧中添加低劑量(0~0.4mg/g)大豆凝集素對(duì)大鼠生長(zhǎng)、胰腺和空腸重量沒(méi)有明顯影響.但大鼠體增重和屠體干重隨著日糧大豆凝集素水平升高而線(xiàn)性降低(P<0.05),當(dāng)日糧凝集素水平為2.0mg/g時(shí),顯著低于對(duì)照組大鼠(P<0.05).血漿胰島素和膽囊收縮素水平分別隨著凝集素水平增加而降低或升高(P<0.05).大豆凝集素誘發(fā)多胺依賴(lài)的小腸和胰腺的增生,并伴隨著蛋白質(zhì)、RNA和DNA含量的增加(P<0.05).日糧