麥冬凝集素的分離純化及其部分性質(zhì)研究.pdf

1、性作用并不明顯。SDS對(duì)OJL的變性作用研究表明隨著SDS濃度的增加，OJL的凝血活性逐漸略有下降，在SDS濃度達(dá)到20mmol／L時(shí)，則由于發(fā)生明顯的溶血現(xiàn)象，而完全檢測(cè)不到oJL的凝血活性。NBS滴定法修飾OJL，在自然條件下，有1個(gè)Trp殘基被修飾，Trp殘基的修飾并沒有引起OJL活性的明顯改變，但是其熒光強(qiáng)度隨著NBS濃度的增高而下降。2，3丁二酮對(duì)OJL精氨酸殘基的化學(xué)修飾表明修飾后的OJL血凝集活性幾乎完全喪失，且其熒光強(qiáng)度

2、明顯下降。說明Arg是維持其活性的必需基團(tuán)，可能位于OJL的血凝活性中心或位于中心附近參與了活性中心構(gòu)象的維持，Arg被修飾后OJL活性的喪失很可能是由于活性中心的破壞或活性中心構(gòu)象的改變所造成的。而其他氨基酸的化學(xué)修飾研究表明TyrSer／Thr等殘基與OJL凝集活性無關(guān)，氨基酸的修飾并沒有引起活性的改變。天然OJL的內(nèi)源熒光光譜研究表明：激發(fā)光波長(zhǎng)為280nm時(shí)，其最大熒光發(fā)射峰位在328nm處，熒光光譜未見有酪氨酸(Tyr)殘基的

3、發(fā)射峰，表明OJL分子中很可能發(fā)生了從Tyr到Tip的能量轉(zhuǎn)移；激發(fā)波長(zhǎng)為295nm時(shí)，其最大熒光發(fā)射峰位也在328nm處，比游離Trp的最大熒光發(fā)射峰(348nm)藍(lán)移了近20rim，說明Trp周圍的極性較弱，處于疏水的微環(huán)境。不同淬滅劑對(duì)OJL的熒光淬滅研究表明丙烯酰胺作為不帶電荷的中性淬滅劑能很好的淬滅熒光基團(tuán)的熒光，而且?guī)缀跏峭耆銣?9346％)。而對(duì)于帶電荷的淬滅劑Csa和Ⅺ對(duì)OJL的熒光淬滅程度較小(分別為4125％和55