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1、該研究利用甲基化特異性PCR技術(shù)、免疫組織化學方法對結(jié)直腸癌患者的腫瘤組織中p16基因的甲基化、p16蛋白進行了檢測;同時利用微衛(wèi)星分析方法對hMLH1,hPMS1,hPMS2,hMSH2,hMSH3和hMSH6等錯配修復(fù)基因(Mismatch repair genes, MMR)和p16基因雜合性缺失(LOH)進行了分析,結(jié)果如下:1.結(jié)直腸癌患者p16基因的甲基化整體的檢出率為41﹪,表明p16基因的甲基化是結(jié)直腸癌腫瘤組織中常見的
2、遺傳學改變.2.p16基因啟動子區(qū)甲基化在Dukes分期A、B和C、D期中發(fā)生率分別為20﹪和59﹪,差異顯著(P<0.05);低分化腫瘤組織中p16基因啟動子區(qū)甲基化發(fā)生率為100﹪,中、高分化腫瘤組織中p16基因啟動子區(qū)甲基化發(fā)生率為30﹪,二者差異非常顯著(P<0.01);具有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人腫瘤組織中p16基因甲基化的陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人,并呈顯著性差異(59﹪ vs 20﹪, P<0.05).3.p16蛋白在結(jié)直腸癌中
3、整體的表達率為75.7﹪(28/37).Dukes病理分期也顯示C、D期的表達率(71﹪)比A、B期的表達率(80﹪)低,但二者差異不顯著(P>0.05);高、中分化腫瘤組織中p16蛋白的表達率(87﹪)遠高于低分化癌的表達率(17﹪),二者差異非常顯著(P<0.01)p16蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中的表達率(71﹪)低于未轉(zhuǎn)移的表達率(80﹪),但差異不顯著(P>0.05);結(jié)直腸癌在不同的位置同樣也受到p16蛋白的影響,結(jié)腸癌的p16
4、蛋白的表達率明顯要高于直腸癌的表達率(100﹪ vs 68﹪,P<0.05),二者差異顯著;4.p16基因雜合子丟失在結(jié)直腸癌中發(fā)生比例較高(31.7﹪),表明p16基因雜合子丟失是導(dǎo)致p16基因失活的重要原因.5.6個MMR基因在結(jié)直腸癌中LOH發(fā)生的比例由高到低分別為hMSH3(30﹪),hPMS2(25﹪),hMLH1(26.7﹪),hMSH2/hMSH6(26.3﹪),hPMS1基因未發(fā)現(xiàn)雜合性缺失.我們的研究表明,在中國人結(jié)直
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