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1、目的:觀察不同條件下大鼠肢缺血再灌注后脊髓神經(jīng)元c-fos表達(dá)的變化,探討肢體缺血再灌注對(duì)脊髓神經(jīng)元c-fos表達(dá)的影響及氟比洛芬酯的干預(yù)作用。
方法:成年健康雄性SD大鼠78只,隨機(jī)分為4組:①假手術(shù)組(S組,n=24),只進(jìn)行麻醉并解剖股血管和股神經(jīng),不做其他處理。②肢體缺血4h再灌注組(IR組,n=24)。③嗎啡+肢體缺血4h再灌注組(M+IR組,n=24),建立缺血模型前,于大鼠鞘內(nèi)注入嗎啡10μg(100μl)。
2、以上3組按照再灌注時(shí)間(1h、4h、8h、12h)又分為4個(gè)時(shí)相,每時(shí)相6只大鼠。④氟比洛芬酯干預(yù)組(F組,n=6),在M+IR組的基礎(chǔ)上,分別于注入嗎啡和再灌注前10min經(jīng)大鼠尾靜脈注射氟比洛芬酯注射液2mg·kg-1,本組再灌注時(shí)間為4h一個(gè)時(shí)相。實(shí)驗(yàn)結(jié)束,采用心臟灌注處死大鼠,取腰段脊髓(L1~5)采用免疫組織化學(xué)方法(ABC法)檢測(cè)各組大鼠脊髓Fos蛋白陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)情況和分布特點(diǎn)。
結(jié)果:與S組比較,IR、M+
3、IR組再灌注后各時(shí)相大鼠脊髓fos免疫陽(yáng)性神經(jīng)元(FLIN)的數(shù)量都顯著增加(P<0.05)。在再灌注1h、4h、8h時(shí)IR組FLIN的數(shù)量要高于M+IR組(P<0.05),12h時(shí)兩組FLIN數(shù)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IR組四個(gè)時(shí)相中1h時(shí)FLIN數(shù)量最多,分布以脊髓后角淺層為主,4h、8h、12h、fos蛋白的表達(dá)依次減少,但分布范圍較廣,前后角各層及中央管周圍都有表達(dá)。M+IR組4h時(shí)FLIN的數(shù)量達(dá)到峰值,8h開(kāi)始減弱,分布以后角各
4、層及中央管周圍為主,分布特點(diǎn)無(wú)明顯變化。F組同M+IR組4h時(shí)相比較FLIN的數(shù)量有明顯降低(P<0.05).
結(jié)論:肢體缺血再灌注引起脊髓相應(yīng)節(jié)段fos免疫陽(yáng)性神經(jīng)元(FLIN)數(shù)量顯著增加,再灌注初期FLIN的增加主要由缺血再灌注產(chǎn)生的疼痛引起,F(xiàn)LIN神經(jīng)元以參與疼痛調(diào)控為主。隨著再灌注時(shí)間延長(zhǎng)和疼痛刺激減弱,缺血再灌注損傷成為再灌后期FLIN增加的主要原因,此處FlIN更多是參與刺激的中繼活動(dòng)影響神經(jīng)元的代謝與功能
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