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1、本實(shí)驗(yàn)試圖建立一個健康長壽的綿羊顆粒細(xì)胞系,為基因打靶技術(shù)平臺提供一個良好的體細(xì)胞系,通過摸索不同的原代培養(yǎng)途徑,建立了一套穩(wěn)定的綿羊顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系。在此基礎(chǔ)上,轉(zhuǎn)染pLPC-hTERT,通過嘌呤霉素的篩選獲得陽性細(xì)胞系。利用染色體核型分析和軟瓊脂生長試驗(yàn)等細(xì)胞生物學(xué)手段檢測,結(jié)果表明陽性細(xì)胞沒有發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。利用RT-PCR、TRAP-銀染法和southern等分子生物學(xué)手段檢測,結(jié)果表明陽性細(xì)胞中存在有外源的hTERT,其端粒酶的
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