PPAR-γ配體pioglitazone對(duì)膽管癌細(xì)胞體外侵襲力的影響及相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控.pdf

1、目的：肝門部膽管癌因位置特殊、起病隱匿，故早期診斷不易，手術(shù)切除率較低，預(yù)后不容樂(lè)觀。選擇MMP-7及其抑制物TIMP-1作為膽管癌的侵襲相關(guān)基因從而在基因水平研究膽管癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移機(jī)制是必要的。本實(shí)驗(yàn)旨在明確肝門膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞中是否存在MMP-7和TIMP-1表達(dá)，為我們今后的實(shí)驗(yàn)打下理論基礎(chǔ)。 方法：通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-polymerase chainreacti

2、on，RT-PCR)，檢測(cè)體外培養(yǎng)的肝門膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞中兩個(gè)目的基因MMP-7、TIMP-1 mRNA水平的表達(dá)。 結(jié)果：MMP-7 mRNA、TIMP-1 mRNA在QBC939細(xì)胞中均有表達(dá)，且前者的表達(dá)水平高于后者。 結(jié)論：通過(guò)RT-PCR對(duì)QBC939細(xì)胞的檢測(cè)，證實(shí)了MMP-7和TIMP-1基因在mRNA水平皆有表達(dá)。 第二部分 PPAR—γ經(jīng)其配體Piog litazone激活后

3、對(duì)人肝門部膽管癌細(xì)胞系GBC939 mP-7、TIMP-1mRNA表達(dá)的影響目的：探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)經(jīng)其配體吡格列酮(Pioglitazone，PGZ)激活后對(duì)肝門部膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞的增殖和MMP-7、TIMP-1表達(dá)的影響。 方法：通過(guò)四氮唑藍(lán)比色法(MTT)檢測(cè)不同濃度、不同時(shí)間點(diǎn)PGZ對(duì)QBC939細(xì)胞的抑制率；通過(guò)熒光定量PCR(FQ-PCR)檢測(cè)不同濃度的PGZ干預(yù)12小時(shí)對(duì)

4、QBC939細(xì)胞MMP-7、TIMP-1 mRNA表達(dá)的影響。 結(jié)果：在24、48、72小時(shí)干預(yù)點(diǎn)，PGZ明顯抑制了QBC939細(xì)胞的生長(zhǎng)，各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，有顯著性差異(P<0.001)；而12小時(shí)、PGZ濃度40μmol/l以下時(shí)，無(wú)明顯的細(xì)胞毒性作用(P>0.05)。PGZ能下調(diào)QBC939細(xì)胞MMP-7 mRNA的表達(dá)(P<0.001)，并有劑量依賴效應(yīng)；TIMP-1有上調(diào)趨勢(shì)，但未顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.125)

5、。 結(jié)論：PPAR-γ經(jīng)其配體PGZ激活后對(duì)QBC939細(xì)胞的增殖有抑制作用;PGZ能下調(diào)MMP-7 mRNA表達(dá)，并有劑量依賴效應(yīng)。 目的：探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPAR-γ)經(jīng)其配體Pioglitazone(PGZ)激活后對(duì)人肝門部膽管癌細(xì)胞系QBC939細(xì)胞的體外侵襲力的影響。 方法：通過(guò)Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)測(cè)定QBC939細(xì)胞經(jīng)PPAR-γ配體PGZ作用后穿透人工基底膜的情況；通過(guò)過(guò)河實(shí)