硫酸核糖霉素的質量研究.pdf

1、本文探討了氨基糖苷類抗生素—核糖霉素的質量研究方法。核糖霉素是核糖苷鏈霉菌產生的抗生素，對革蘭氏陽性、陰性菌均有抑制作用，其活性較卡那霉素稍低，但毒性較小。核糖霉素結構中不含紫外吸收基團、極性強、揮發(fā)性差，不適合采用HPLC-UV法進行檢測。中國藥典（2005年版）二部收載了硫酸核糖霉素及注射用硫酸核糖霉素，《國家藥品標準》（化學藥品地方標準上升國家標準第二冊）收載有硫酸核糖霉素注射液。日本藥局方也收載了該品種。上述藥品標準僅收載了微生

2、物法測定硫酸核糖霉素的含量，其有關物質的檢查均未見報道。 本課題對硫酸核糖霉素的質量研究，包括硫酸核糖霉素有關物質檢查方法（TLC法，HPLC-ELSD法）和含量測定方法（HPLC-ELSD法）的建立，以及與傳統(tǒng)的微生物法含量測定的比較；并根據(jù)WHO對化學參考物質的純度要求，進行了核糖霉素對照品的相關研究工作。為新版中國藥典中核糖霉素原料和制劑的有關物質檢查方法和含量測定方法的建立提供了參考，為其原料和制劑在生產過程中的質量控制

3、提供了依據(jù)。本研究分為三個部分： 一、建立了硫酸核糖霉素中有關物質檢查的方法。首先采用了薄層色譜法。由于各國藥典均沒有收載硫酸核糖霉素有關物質檢查項，同時相關的文獻資料不多，建立薄層色譜法檢測其有關物質時嘗試了多種展開系統(tǒng)，以達到最優(yōu)的分離效果。最終建立的薄層色譜條件是：以硅膠G為吸附劑，以2-丁酮-甲醇-異丙醇-濃氨水-水（10：12：3：8：2）為展開劑，用0.2％的茚三酮的水飽和正丁醇溶液作為顯色劑，在110℃干燥20mi

4、n顯色。在該色譜條件下，硫酸核糖霉素原料和注射用硫酸核糖霉素中的主成分和其它雜質能有效分離。其次建立了HPLC-ELSD法測定硫酸核糖霉素中有關物質的方法。國內外已有多篇關于HPLC-ELSD法在氨基糖苷類抗生素中的應用，但未見有關核糖霉素的報道。參考國外有關氨基糖苷類抗生素的文獻，以Dionex Acclaim C18 柱（4.6mm×250mm,5μm），以含0.8％五氟丙酸的20mmol/L醋酸銨溶液-甲醇（55：45）作流動相，

5、用蒸發(fā)光散射檢測器檢測，首次建立了硫酸核糖霉素有關物質檢查的高效液相-蒸發(fā)光散射檢測法。所建立的有關物質檢查方法在3.9893μg/ml～35.904μg/ml的濃度范圍內濃度線性良好。 二、在測定硫酸核糖霉素含量方面，分別采用HPLC-ELSD法和傳統(tǒng)微生物法測定了不同廠家共5批硫酸核糖霉素原料和6批注射用硫酸核糖霉素的含量，并分析比較了兩者測定的結果。結果顯示：對于所有的樣品，采用微生物法測定的結果明顯高于HPLC-ELSD

6、法測得的結果。這與樣品中含有新霉胺等活性雜質有關。上述結果還顯示：在硫酸核糖霉素含量測定方面，HPLC-ELSD法能有效排除活性雜質的干擾，比微生物法具有更多的優(yōu)點。 三、建立了核糖霉素對照品的相關研究工作。根據(jù)單組分抗生素對照品的確定原則，主成分扣除有機雜質，水分，揮發(fā)成分，灰分后為其主成分的純度。本課題選取一批硫酸核糖霉素原料，分別采用了HPLC-ELSD法測定硫酸核糖霉素主成分，GC法測定了19種有機溶劑的殘留，用減壓干燥