奧曲肽對(duì)兔小梁切除術(shù)后瘢痕增殖的影響.pdf

1、目的:小梁切除術(shù)是目前最常用的抗青光眼手術(shù)方式之一,術(shù)后濾過(guò)泡的瘢痕化導(dǎo)致的濾過(guò)道閉鎖是手術(shù)失敗的最主要原因。因此為提高手術(shù)成功率,一些抗增殖藥物逐漸應(yīng)用到手術(shù)當(dāng)中。實(shí)踐證明絲裂霉素C(mitomycine-C,MMC)可明顯提高難治性青光眼小梁切除術(shù)的成功率,目前將MMC作為金標(biāo)準(zhǔn)。但是MMC在發(fā)揮抗瘢痕作用的同時(shí)也產(chǎn)生諸多毒副作用。奧曲肽(octreotide,OCT)是一種生長(zhǎng)抑素的類(lèi)似物,研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)多種細(xì)胞的增殖都有抑制作用,

2、且毒副作用小。
　　 本實(shí)驗(yàn)在兔小梁切除術(shù)中鞏膜瓣下應(yīng)用OCT和/或術(shù)前3天點(diǎn)眼,通過(guò)觀察濾過(guò)泡的形態(tài)及維持時(shí)間,眼壓的變化、手術(shù)區(qū)域組織的增殖情況、增殖細(xì)胞的標(biāo)記指數(shù)等,評(píng)價(jià)其對(duì)術(shù)后濾過(guò)道瘢痕增殖有無(wú)抑制作用。并與術(shù)中鞏膜瓣下應(yīng)用。MMC作對(duì)比以確定其療效。探討術(shù)前點(diǎn)眼能否作為一種抑制術(shù)后瘢痕增殖的給藥方式。通過(guò)術(shù)后眼前后節(jié)檢查以及電生理儀器檢查與術(shù)前比較測(cè)定OCT的安全性。
　　 方法:
　　 1.篩選健康無(wú)

3、眼疾的新西蘭大白兔40只,常規(guī)飼養(yǎng)一周。
　　 2.術(shù)前常規(guī)測(cè)量并記錄每只兔子的眼壓。
　　 3.術(shù)前常規(guī)測(cè)量并記錄每只兔子的眼電生理。
　　 3.1.做閃光視覺(jué)誘發(fā)電位(flash visual evoked potential,F-VEP)檢查,記錄P2波的潛伏期。
　　 3.2.做全視野視網(wǎng)膜電流圖(full-field electroretinogram,FERG)檢查,記錄暗視視桿反應(yīng)(Rod-

4、R)和暗視混合反應(yīng)(Max-R)的b波振幅。
　　 4.將40只兔子隨機(jī)分成A、B、C、D、E5組各組均由同一術(shù)者行雙眼標(biāo)準(zhǔn)小梁切除術(shù)。
　　 4.1.A組作為空白對(duì)照組:僅行標(biāo)準(zhǔn)小梁切除術(shù)。
　　 4.2.B組作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照組:術(shù)中將0.2mg/ml MMC的棉片放于鞏膜瓣下5分鐘,然后用100ml生理鹽水充分沖洗。
　　 4.3.C組作為實(shí)驗(yàn)I組:術(shù)中將0.1mg/ml的OCT的棉片放于鞏膜瓣下5分鐘,

5、然后用100ml生理鹽水充分沖洗。
　　 4.4.D組作為實(shí)驗(yàn)Ⅱ組:術(shù)前3天0.1mg/ml的OCT點(diǎn)眼,每日四次。同時(shí)術(shù)中將0.1mg/ml的OCT的棉片放于鞏膜瓣下5分鐘,然后用100ml生理鹽水充分沖洗。
　　 4.5.E組作為實(shí)驗(yàn)Ⅲ組:術(shù)前3天0.1mg/ml的OCT點(diǎn)眼,每日四次。
　　 5.術(shù)后3、7、14、28天時(shí)分別觀察每組兔子眼前節(jié)及眼底情況、電生理的變化。觀察并記錄各組眼壓及濾過(guò)泡形態(tài)及維持時(shí)

6、間。
　　 6.術(shù)后3、7、14、28天每組隨機(jī)處死兩只兔,摘除眼球,取手術(shù)區(qū)全層眼球壁固定、石蠟包埋,制成切片。做HE染色,光鏡下觀察濾過(guò)道開(kāi)放、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增殖情況;經(jīng)Masson三色染色,觀察濾過(guò)道新生膠原纖維生成情況;做增殖細(xì)胞核抗原(proliferative cell nucleus antigen PCNA)染色,光鏡下計(jì)數(shù)濾過(guò)道內(nèi)標(biāo)記細(xì)胞與細(xì)胞總數(shù)的百分比,即標(biāo)記指數(shù),從而評(píng)價(jià)濾過(guò)道內(nèi)細(xì)胞的增殖程度。
　

7、　 結(jié)果:
　　 1.裂隙燈檢查:A、B、C、D、E各組結(jié)膜均愈合良好;角膜熒光素染色大部分眼都有不均勻著色,但各組例數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均無(wú)角膜水腫;前房均無(wú)出血、滲出,無(wú)淺前房出現(xiàn)。無(wú)白內(nèi)障的發(fā)生。后四組功能性濾過(guò)泡的維持時(shí)間明顯比A組延長(zhǎng)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.眼底鏡檢查;各組均無(wú)視網(wǎng)膜或脈絡(luò)膜脫離出現(xiàn)。
　　 3.眼電生理檢查:視神經(jīng)以及視網(wǎng)膜均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)。
　　

8、4.眼壓檢查:各組術(shù)后眼壓平均值均較術(shù)前降低,術(shù)后3天時(shí)明顯降低,術(shù)后7-14天時(shí)略有升高,術(shù)后28天時(shí)再次降低。各組術(shù)前與術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)眼壓值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);術(shù)后3天與術(shù)后14天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),術(shù)后14與術(shù)后28天差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其余各時(shí)間點(diǎn)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。五組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見(jiàn)圖1及表2)。
　　 5.病理組織學(xué)改變
　　

9、 5.1.HE染色(Fig.2-21):
　　 術(shù)后除第3天,各組增殖均不明顯外,其余各時(shí)間點(diǎn)B、C、D、E四組術(shù)后瘢痕的增殖均較A組減輕。濾過(guò)泡和濾過(guò)道也更明顯。術(shù)后7天時(shí)除B組外各組結(jié)膜下及濾過(guò)道內(nèi)均出現(xiàn)纖維組織的大量增生,較疏松,內(nèi)充滿大量的成纖維細(xì)胞,濾過(guò)道內(nèi)增殖程度:A＞E＞C＞D＞B組。術(shù)后14天時(shí)各組增生的纖維組織變得較致密,A組濾過(guò)道閉鎖,濾過(guò)道內(nèi)增殖程度:A＞E=B=C＞D組。術(shù)后28天時(shí)A組濾過(guò)泡及濾過(guò)道均以

10、閉鎖。其余各組濾過(guò)泡腔隙存在,濾過(guò)道殘留多個(gè)小腔隙。濾過(guò)道內(nèi)增殖程度:A＞E＞C=B＞D組。
　　 5.2.Masson三色染色(Fig.22-31)
　　 術(shù)后3天時(shí)各組膠原纖維增生均不明顯。7天時(shí)除B組外各組膠原纖維增生均較明顯,均較為纖細(xì)、疏松。成纖維細(xì)胞較多。于14天時(shí)B、E組有中量的膠原纖維生成,而其余各組濾過(guò)道區(qū)域均為粗大的膠原纖維,與濾過(guò)道周?chē)心z原纖維融合。28天時(shí)各組濾過(guò)道區(qū)域均為粗大的膠原纖維,與濾

11、過(guò)道周?chē)心z原纖維融合。各組的增殖程度與HE染色結(jié)果一致。
　　 5.3.PCNA染色(Fig.32-40)
　　 術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞的標(biāo)記指數(shù)(見(jiàn)表6),術(shù)后7天時(shí)A組高于B、C、D、E三組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.005),B、C、D、E四組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.005)。術(shù)后14天時(shí)A、B組高于C、D、E三組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.005),A、B兩組之間以及C、D、E三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(]P

12、＞0.005)。術(shù)后28天時(shí),A、B、C、D、E五組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.OCT鞏膜瓣下應(yīng)用或術(shù)前3天局部點(diǎn)眼,能有效抑制手術(shù)區(qū)域瘢痕的增殖。
　　 2.OCT鞏膜瓣下應(yīng)用抗瘢痕增殖遠(yuǎn)期效果優(yōu)于術(shù)前3天局部點(diǎn)眼用藥。
　　 3.鞏膜瓣下應(yīng)用聯(lián)合術(shù)前3天局部點(diǎn)眼抗增殖作用明顯增強(qiáng)。
　　 4.濃度為0.1mg/ml的OCT與濃度為0.2mg/ml MMC抗增