外界刺激與環(huán)境脅迫對背角無齒蚌免疫因子的影響.pdf

1、近年來養(yǎng)殖貝病頻頻爆發(fā)，嚴(yán)重制約了貝類養(yǎng)殖健康持續(xù)發(fā)展。目前認(rèn)為，機(jī)體抗病力的下降是導(dǎo)致流行性死亡的主要原因之一。因此，深入研究貝類免疫防御特性，有助于了解和解決貝類養(yǎng)殖中的病害問題。本文以我國廣泛分布的背角無齒蚌為對象，研究了環(huán)境因子變化和外源刺激對其體內(nèi)一些體液性免疫因子的影響，以期更好地了解貝類的防御機(jī)制，為淡水貝類病害防治提供資料。研究結(jié)果如下： 1.以嗜水氣單胞菌(1.6×10<'8> cell/mL)注射到背角無齒蚌

2、體內(nèi)，測定了蚌的血清和肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)及過氧化氫酶(CAT)活力的變化。結(jié)果表明，在注射3 h，6h，12 h，24 h，48 h后，SOD和PO的活力變化顯著，其中SOD活力明顯升高，血清PO活力先升后降，肝胰腺PO活力也一直增高；但ACP、AKP及CAT活性變化不明顯。本研究表明，SOD、PO活性可作為背角無齒蚌免疫抗病功能指標(biāo)參數(shù)，而ACP、AKP及CA

3、T活性能否作該參數(shù)還有待于進(jìn)一步研究。 2.檢測和探討了嗜水氣單胞菌(3.0×10<'9>cell/mL)與枯草芽孢桿菌(5.92×10<'9>cell/mL)感染對背角無齒蚌血淋巴中一氧化氮(NO)濃度、過氧化氫(H<,2>O<,2>)含量、抗菌活力(Ua)、溶菌活力(U<,L>)及溶血素活力的變化。試驗(yàn)表明，注射6h、24h、48h和72h后，嗜水氣單胞菌對蚌血細(xì)胞抗菌活力無明顯影響，但對背角無齒蚌血淋巴其它免疫因子均有不同

4、程度增高作用；枯草芽孢桿菌也能有效提高背角無齒蚌血清中NO濃度、H<,2>O<,2>含量、溶血素活力及血清溶菌活力，但對血清和血細(xì)胞中抗菌活力與血細(xì)胞溶菌活力有所抑制，表明這兩種菌對無齒蚌可能存在著不同的作用機(jī)理。 3.研究了注射不同劑量(30ug/g和50ug/g)Vc對無齒蚌體內(nèi)NO濃度、總抗氧化能力(T-AOC)、溶菌酶(LSZ)和CAT活性的影響。結(jié)果表明，注射Vc后12、36、60和72 h，兩實(shí)驗(yàn)組蚌體內(nèi)NO濃度與L

5、SZ活性都明顯升高，而T-AOC與CAT活性則有所下降。且Vc對30ug/g組各種因子的刺激效果比50ug/g組更好，說明.50u/g的劑量己對無齒蚌產(chǎn)生一定毒性，需經(jīng)代謝消耗一部分后才能起到抗氧化作用。本研究表明，Vc可有效增強(qiáng)該蚌免疫活性，且因劑量不同而有差異。 4.檢測分析了升溫刺激對背角無齒蚌中SOD、CAT活性及MDA含量的影響情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖水溫從20℃分別緩慢升高到30℃和33℃兩天后能明顯提高蚌體內(nèi)SOD活性

6、、MDA含量及肝胰腺CAT活性，但對血清CAT活性影響不顯著。結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，高溫脅迫下蚌血清及肝胰腺中脂質(zhì)過氧化程度與SOD及CAT等抗氧化酶活性變化無必然聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)表明，高溫脅迫會使機(jī)體受到損傷，從而導(dǎo)致免疫防御力下降。 5.利用不同pH值(6.0，6.5，6.8，7.5，8.0，8.5)的環(huán)境脅迫背角無齒蚌，7d后，蚌體內(nèi)SOD、CAT、ACP、AKP活性及MDA含量等五種免疫指標(biāo)有明顯變化。結(jié)果表明；在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)，當(dāng)'pH高

7、于正常組(pH 6.8)時(shí)，上述SOD、CAT活性隨pH值的增加而明顯降低，ACP及AKP活性則呈降升降起伏式變化：但MDA含量升高；當(dāng)pH低于正常組時(shí)，四種酶活性隨pH值增加呈不同程度上升趨勢，而MDA含量則持續(xù)降低。結(jié)果說明，pH對背角無齒蚌免疫活性有明顯的刺激作用，且在高強(qiáng)度pH刺激下，蚌免疫活性呈現(xiàn)出負(fù)調(diào)節(jié)，這種負(fù)調(diào)節(jié)可能與高強(qiáng)度刺激引起的免疫機(jī)能疲勞或損傷有關(guān)。 6.測定了鎘離子(1.25mg/L)暴露對背角無齒蚌的T

8、.AOC、CAT、PO活性以及MDA含量的影響。結(jié)果表明，在鎘離子暴露1d、3d、5d后，蚌血清與肝胰腺中除T-AOC活力明顯降低外，其中CAT活力、PO活性與MDA含量均顯著升高。說明鎘離子對蚌體抗氧化等機(jī)能造成損傷，導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物形成。 7.研究了不同濃度(2.5、5.0、10、20、40 mg/L)的氨氮脅迫背角無齒蚌，7d后，蚌的SOD與CAT兩種抗氧化性酶及ACP、AKP和LSZ三種水解酶活性的變化。結(jié)果表明，氨氮