核黃素聯(lián)合紫外光滅活血小板懸液中的病毒及抑制細(xì)胞因子的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、滅活成份血液內(nèi)的病原體、抑制其殘留的白細(xì)胞釋放細(xì)胞因子是保證臨床安全輸血的一種重要手段。目前,對(duì)于血漿的病原體滅活技術(shù)發(fā)展相對(duì)成熟,已有部分應(yīng)用于臨床,而對(duì)于紅細(xì)胞和血小板尚屬于研究階段。先前,有學(xué)者使用亞甲藍(lán)(MB)光化學(xué)和補(bǔ)骨酯衍生物(Amotosalen)S-59光化學(xué)可有效滅活血小板內(nèi)模型病毒和白細(xì)胞,但MB光化學(xué)法處理的血小板對(duì)FⅧ和纖維蛋白原影響較大,而且MB法本身有一定的生物毒性;而經(jīng)S-59處理后的血液,需用特殊儀器將其

2、去除,因此以上兩種方法均不理想。核黃素是人體必需的一種水溶性的維生素,廣泛的存在于人體器官中,它可插入病原體RNA和DNA,在紫外/可見(jiàn)光激活下,發(fā)生電子轉(zhuǎn)移,與病原體核酸的鳥(niǎo)嘌呤共價(jià)結(jié)合,介導(dǎo)核酸斷裂。本研究運(yùn)用紫外光作為激發(fā)光源聯(lián)合核黃素來(lái)滅活單采血小板懸液中的指示病毒,同時(shí)抑制血小板內(nèi)殘留的白細(xì)胞釋放細(xì)胞因子。
  目的:研究核黃素聯(lián)合紫外光進(jìn)行血小板病毒滅活的安全性、有效性及對(duì)血小板保存中白細(xì)胞釋放細(xì)胞因子抑制作用;觀(guān)察滅

3、活后血小板體外各參數(shù)的變化。
  方法:實(shí)驗(yàn)組:將人巨細(xì)胞病毒標(biāo)準(zhǔn)株(HCMVAD169)以一定比例注入單采血小板中,混勻后加入核黃素溶液,以一定輻照劑量的紫外光照射,檢測(cè)照射前、后病毒滴度和照射后不同時(shí)間細(xì)胞因子的變化,并觀(guān)察體外血小板部分參數(shù)的變化。陰性對(duì)照組:為相同來(lái)源新鮮單采血小板,同步檢測(cè)其細(xì)胞因子的含量和血小板體外各參數(shù)。以植物凝集素(PHA)同步刺激兩組血小板,用ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞因子的含量。
  結(jié)果:實(shí)

4、驗(yàn)組經(jīng)濃度150μmol/L的核黃素結(jié)合輻照劑量為1500mJ/cm2的紫外光(250<λ<350nm)照射10min可有效滅活血小板中病毒;對(duì)照組細(xì)胞因子含量隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加;實(shí)驗(yàn)組第3d和第5d的細(xì)胞因子含量相對(duì)于保存前(0d)差異無(wú)顯著意義;而在同一保存時(shí)間對(duì)照組中細(xì)胞因子含量高于實(shí)驗(yàn)組(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血小板懸液經(jīng)過(guò)PHA同步刺激后:接受PHA刺激的對(duì)照組與未接受PHA刺激的對(duì)照組相比,細(xì)胞因子含量顯著

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