流動式核黃素光化學(xué)法病毒滅活血漿制備體系的建立與效果評價(jià).pdf

1、目的
　　基于核黃素聯(lián)合紫外線滅活血漿病毒的方法原理，研制出一種流動式的血漿病毒滅活設(shè)備，實(shí)現(xiàn)流動式批量處理血漿的目的，評估經(jīng)該設(shè)備處理后，血漿中血漿病毒滅活效果和血漿蛋白的保持率。
　　方法
　　1.根據(jù)大量關(guān)于核黃素光化學(xué)法的文獻(xiàn)，以及對Mirasol系統(tǒng)的研究，建立核黃素光化學(xué)法滅活病毒所需的基本參數(shù)。自主設(shè)計(jì)流動式病毒滅活設(shè)備的圖紙，挑選最佳方案，制作實(shí)驗(yàn)室小試成品。
　　2.對制作成型的設(shè)備進(jìn)行主要參數(shù)

2、的測定和測量，包括紫外燈的測定和樣品管的測量，保證設(shè)備的再塑性。
　　3.在血漿中加入一定量的病毒液模擬病毒污染血漿的狀況(血漿:病毒液為10∶1)，再加入終濃度為60μmol/L的核黃素溶液。在經(jīng)設(shè)備不同時(shí)間的處理后，測定處理前和不同時(shí)間處理后血漿中病毒的毒力(TCID50)，計(jì)算得出不同處理時(shí)間的病毒滅活效果。
　　4.選中四種血漿中的主要功能蛋白，在經(jīng)設(shè)備不同時(shí)間的處理后，測定處理前和不同時(shí)間處理后蛋白的活性，計(jì)算得出

3、不同處理時(shí)間的蛋白保持率。
　　結(jié)果
　　1.選定了紫外燈夾心石英管方案。
　　2.制作成型的設(shè)備，紫外光譜為313nm聯(lián)合365nm寬帶波峰，照射強(qiáng)度為6mW/cm2。石英流動管的透光率為95％，內(nèi)徑5mm，壁厚1mm。
　　3.選定了5min、10min、15min、20min四種處理時(shí)間。在5min處理后，病毒滅活效果最低，隨著處理時(shí)間的延長，病毒滅活效果也在增強(qiáng)。當(dāng)時(shí)間達(dá)到10min時(shí)，VSV、PRV、E

4、MCV、PPV的平均滅活滴度大于4 logs;當(dāng)處理時(shí)間達(dá)到20 min后，指示病毒的滅活滴度都達(dá)到5.5 logs以上。
　　4.經(jīng)不同時(shí)間的設(shè)備處理后，不同蛋白會對設(shè)備的處理產(chǎn)生不同的敏感度:在處理10min時(shí)，保持率最高的為AT-Ⅲ的90％，保持率最低為纖維蛋白原的60％;當(dāng)處理時(shí)間為20min時(shí)，蛋白損失嚴(yán)重，最低的保持率是纖維蛋白原僅僅為28％。
　　結(jié)論
　　1.在不同的處理時(shí)間，病毒滅活效果和蛋白保持率也