骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在促進(jìn)大鼠隨機皮瓣存活中的作用與機制探討.pdf

1、目的：體外培養(yǎng)rMSCs并觀測其特性，觀察rMSCs體內(nèi)促進(jìn)大鼠隨機皮瓣存活的作用并探討其可能的機制。 方法：體外分離培養(yǎng)rMSCs，流式細(xì)胞儀(FCM)檢測其表面標(biāo)志。盯一PCR檢測rMSCs的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)表達(dá)情況。Western-blotting檢測rMSCs培養(yǎng)液的VEGF。SD大鼠隨機分成2組：rMSCs組、對照組，于背部形成L5cmX8cm的超長隨意皮瓣。以4’，6--脒基一2一苯吲哚(DAPI)標(biāo)

2、記rMSCs，消化、離心、計數(shù)，注射于皮下，術(shù)后7天觀察皮瓣的存活情況，計算皮瓣壞死率。取皮瓣遠(yuǎn)端標(biāo)本，行HE染色觀察組織學(xué)情況。免疫組化測移植組與對照組的VEGF表達(dá)情況。結(jié)果：rMSCs體外分離培養(yǎng)擴增5代，細(xì)胞數(shù)可達(dá)l×10"，具有多態(tài)性和貼壁生長特性，F(xiàn)CM檢測CD34、CD45陰性，CD29、CD90陽性表達(dá)。體外培養(yǎng)rMSCs能表達(dá)VEGF。術(shù)后七天，在移植組皮下能檢測到DAPI標(biāo)記的細(xì)胞，移植組大鼠皮瓣壞死率明顯小于對照組