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1、目的:研究不同的應(yīng)力刺激對(duì)軟骨細(xì)胞與骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)共培養(yǎng)體外構(gòu)建組織工程化軟骨的影響。 方法:分離、培養(yǎng)、擴(kuò)傳兔BMSCs及軟骨細(xì)胞,二者按7:3比例混和,以5.0×107/mL的細(xì)胞密度接種于聚羥基乙酸(PGA)支架上,一周后根據(jù)不同的施加力分為4組:離心組設(shè)定離心力100g,2次/d,30min/次;搖床組設(shè)定為80r/min,2次/d,30min/次;攪拌組設(shè)定為160r/min,2次/d,30min/次;靜
2、止培養(yǎng)作為對(duì)照組。6周后取材行大體觀察、組織學(xué)、組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、蛋白聚糖(GAG)含量等檢測(cè),比較不同應(yīng)力刺激對(duì)少量軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)BMSCs體外形成軟骨的影響。 結(jié)果:三實(shí)驗(yàn)組即離心組、搖床組及攪拌組形成的細(xì)胞材料復(fù)合物基本保持原來(lái)的體積與外形。HE染色結(jié)果顯示大量成熟軟骨陷窩形成,細(xì)胞外基質(zhì)沉積均勻;Safranin-O及甲苯胺蘭染色顯示有大量的GAG形成,免疫組化檢測(cè)Ⅱ型膠原表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性。三實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本組織濕重(80.0±
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