雷諾嗪后處理對再灌注心肌的保護效應及機制.pdf

1、第一部分雷諾嗪后處理對大鼠離體缺血再灌注心肌的保護效應 目的：觀察不同濃度雷諾嗪后處理對大鼠離體缺血再灌注心肌的保護效應，并與雷諾嗪預處理比較。 方法：48只SD大鼠，隨機分成持續(xù)灌注組(C組)，缺血再灌注組(I/R組)，雷諾嗪20μmol/L 預處理組(RPreC組)，雷諾嗪5μmol/L后處理組(RPostC1組)，雷諾嗪10μmol/L后處理組(RPostC2組)，雷諾嗪20pmol/L后處理組(RPostC3組)

2、，每組8只，建立大鼠離體心臟Langendorff灌注模型，記錄實驗過程中心功能指標：心率(HR)、左室發(fā)展壓(LVDP(LVSP-LVEDP))、左室舒張末壓(LVEDP)、左室內壓最大上升/下降速率(±dp/dtmax)以及冠脈流量(CF)的變化。平衡末，再灌注末測冠脈流液中肌酸激酶(CK)，乳酸脫氫酶(LDH)，心肌肌鈣蛋白Ⅰ(CTnⅠ)的活性。 結果：缺血前雷諾嗪使HR、LNDP、±dp/dtmax輕微下降，但與其余各組

3、無顯著性差異(P>0.05)。再灌注60min時，所有雷諾嗪處理組各心功能指標，CF改善，優(yōu)于I/R組(P<0.05)，RPostC3組與RPreC組心功能指標，CF改善更顯著，優(yōu)于RPostC1組和RPostC2組(P<0.05)。RPostC3組與RpreC間無顯著性差異(P>0.05)。再灌60min時冠脈流液CK、LDH、CTnI的改變與心功能，CF的改變相一致。 結論：雷諾嗪≤20μmol/L對正常大鼠心肌心功能及CF

4、無影響；雷諾嗪后處理對大鼠離體缺血再灌注心肌有保護效應，并呈濃度依賴性；雷諾嗪20μmol/L的心肌保護效應可與雷諾嗪預處理媲美。 第二部分雷諾嗪后處理對大鼠離體缺血再灌注心肌保護效應機制的實驗研究。 目的：探討雷諾嗪對離體大鼠缺血再灌注心肌保護效應的機制。 方法：48只SD大鼠，隨機分為缺血/再灌注組(I/R組)、20μmol/L雷諾嗪后處理組(RPost組)，雷諾嗪加wortmannin(P13K的特異性抑制

5、劑)組(RW組)，雷諾嗪加PD98059(ERK1/2的特異性抑制劑)組(RP組)，雷諾嗪加atractyloside(mPTP開放劑)組(RA組)，wortmannin組(W組)，PD98059組(P組)，atractyloside組(A組)，每組6只，大鼠離體心臟行Langendor罐流。于再灌注15min時測冠脈流液CK、LDH、CTnT含量，測左室心肌組織AKT、ERK1/2的磷酸化、線粒體mPTP開放程度。I/R組、RPost

6、組、RW組、RP組、RA組各組隨機選擇一只大鼠，于再灌注60min時取心尖組織作透射電鏡(transmissionelectron microscope，TEM)觀察其超微結構。 結果：再灌注15min后W、P、A與RA組各組的CK、LDH和CTnI活性與I/R組無顯著性差異(P>0.05)。RW與RP組CK、LDH和CTnI活性低于RA和I/R組(P<0.05)，高于RPost組(P<0.05)。mPTP開放程度，透射電鏡圖象

7、，AKT，ERK1/2磷酸化(RA組除外)的變化與生化指標變化相一致。RA組心肌組織AKT,ERK1/2的磷酸化與RPostC組無顯著性差異(P>0.05)。 結論：雷諾嗪后處理模擬缺血后處理的心肌保護效應，減輕心肌缺血再灌注損傷，與激活P13K-AKT、ERK1/2途徑和抑制mPTP開放有關；雷諾嗪可能還通過RISK途徑(即P13K-AKT和ERK1/2途徑)外其他機制保護心??；mPTP位于P13K-AKT，ERK1/2途徑下

8、游；P13K-AKT，ERK1/2途徑間可能存在交通。 第三部分雷諾嗪后處理對大鼠離體缺血再灌注心肌細胞凋亡與mPTP關系的實驗研究。 目的：探討雷諾嗪后處理是否通過抑制mPTP開放對大鼠離體缺血再灌注損傷心肌有抗凋亡作用。 方法：18只SD大鼠，隨機分為三組，缺血再灌注組(I/R組，n=5)、20μmol/L雷諾嗪后處理組(RPostC組，n=4)、雷諾嗪加atractyloside(mPTP開放劑)組(RA組

9、，n=5)和atractyloside組(A組，n=4)。建立Langendorff離體心臟灌流模型，用TUNEL法檢測再灌注末心肌凋亡，并計算凋亡指數(shù)(apoptotic index，AI)，測n1I)TP開放程度。 結果：與IR組相比，RPostC組心肌中凋亡細胞(TUNEL陽性細胞)減少(P<0.05)。RA組，A組凋亡細胞與IR組無差異(P>0.05)。凋亡指數(shù)，mPTP開放程度與凋亡細胞變化相一致。 結論：雷諾