以26S蛋白酶體為靶點抑制假體無菌性松動的實驗研究.pdf

1、磨損顆粒誘導(dǎo)的血管肉芽腫性炎癥和隨后發(fā)生的炎癥性骨溶解能引起關(guān)節(jié)假體的無菌性松動,影響關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體的存活時間,是假體無菌性松動最常見的原因。然而,發(fā)生這種病變確切的機制目前尚不清楚。很多細(xì)胞類型參與了假體無菌性松動的過程,但其中起著最主要作用的細(xì)胞是巨噬細(xì)胞以及由巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)生成的破骨細(xì)胞。蛋白酶體是一種在所有真核細(xì)胞中都存在的蛋白復(fù)合物,它在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的降解中起著核心作用。大多數(shù)真核細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的降解是通過26S蛋白酶體控制。炎

2、癥過程、基因表達(dá)、細(xì)胞周期調(diào)控都是通過蛋白酶體來調(diào)節(jié)。蛋白酶體控制著NF-Κb的活性和其下游的炎癥介質(zhì)的分泌,調(diào)節(jié)著RANKL、OPG、VEGF、TRAF6的表達(dá),影響著趨化因子以及炎癥性酶的表達(dá)。Bzb是可逆性的,高選擇性的蛋白酶體抑制劑,針對的是26S蛋白酶復(fù)合體,抑制其功能?；诖?我們設(shè)計了體內(nèi)和體外實驗。我們利用小鼠氣囊模型研究抑制蛋白酶體是否會改善Ti顆粒引起的炎癥反應(yīng)及炎癥性骨溶解;是否會影響一些假體松動關(guān)鍵因子如RANK

3、L、OPG、VEGF、TRAF6的表達(dá);是否會影響磨損顆粒誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞的凋亡。體外實驗研究蛋白酶體如何調(diào)控小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞炎性細(xì)胞因子,趨化因子以及炎性酶的表達(dá)。在體內(nèi)實驗中,我們將Ti顆粒注入BALB/C小鼠氣囊來促發(fā)炎癥,然后小鼠腹腔注入Bzb來減輕炎癥反應(yīng),沒有使用Bzb的氣囊用作陽性對照而沒有Ti顆粒刺激也未使用Bzb的氣囊作為陰性對照。隨后,我們以植入顱骨的氣囊模型來研究RANKL、OPG、VEGF和TRA

4、F6的表達(dá)以及Bzb對CD68陽性細(xì)胞凋亡的影響。在體外實驗中我們研究了Bzb對Ti顆粒刺激后的小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞中炎癥相關(guān)介質(zhì)表達(dá)的影響。結(jié)果表明,Bzb干預(yù)后能減輕Ti顆粒刺激后氣囊炎癥介質(zhì)的表達(dá),減輕肉芽腫性組織的形成和顱骨的骨溶解,并且有劑量依賴性;Bzb能誘導(dǎo)CD68陽性細(xì)胞的凋亡,使CD68陽性細(xì)胞的AI升高;Bzb能抑制巨噬細(xì)胞Ti顆粒刺激引起的炎癥反應(yīng),減少促炎細(xì)胞因子、趨化因子和炎癥性酶的分泌,同時增加