2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、鉤端螺旋體?。↙eptospirosis,鉤體病)是一種全球分布的、洪澇時(shí)重點(diǎn)監(jiān)控的人畜共患傳染病,是我國(guó)重點(diǎn)防疫和監(jiān)控的主要傳染病之一。問(wèn)號(hào)鉤端螺旋體(Leptospira interrogans,以下簡(jiǎn)稱(chēng)問(wèn)號(hào)鉤體)是鉤體病的主要病原體,然而其致病機(jī)制至今仍不明確。據(jù)報(bào)道,無(wú)論是真核生物還是原核生物,當(dāng)遭遇不利環(huán)境時(shí),其胞內(nèi)蛋白將會(huì)受到損傷,甚至變性失活,而AAA+(ATPases Associated with diverse ce

2、llular Activities)蛋白酶/蛋白酶體將會(huì)負(fù)責(zé)降解這些受損傷或變性的蛋白。我們推測(cè),對(duì)于問(wèn)號(hào)鉤體而言感染也是一種不利環(huán)境,可能會(huì)導(dǎo)致鉤體蛋白受損或變性失活,而鉤體蛋白酶體很有可能負(fù)責(zé)處理或降解這些蛋白,以利于鉤體在宿主體內(nèi)的生存和繁殖。借助生物信息學(xué)分析手段,我們推測(cè)鉤體至少包含以下三種類(lèi)型的蛋白酶體:HslUV(ClpYQ)、ClpAP和ClpXP。在本研究中,以問(wèn)號(hào)鉤體黃疸出血群賴(lài)型賴(lài)株HslU和HslV為主要研究對(duì)象

3、,我們發(fā)現(xiàn)無(wú)論是重組HslU/HslV(rHslU/rHslV)還是天然HslU/HslV(nHslU/nHslV)蛋白復(fù)合體(r/nHslU1~8HslV1,即r/nHslU與r/nHslV的摩爾比分別為1∶1~8∶1)僅能水解糜蛋白酶樣底物,其Km值和Kcat值分別為43.3μmol·L-1和51.7s-1,且其水解能力僅能被蘇氨酸蛋白酶抑制劑阻斷。熒光共聚焦顯微鏡檢查和熒光分光光度法檢測(cè)結(jié)果表明,在問(wèn)號(hào)鉤體感染J774A.1巨噬細(xì)

4、胞過(guò)程中,其胞內(nèi)受損或變性蛋白水平顯著增加,而在hslU和hslV基因缺失突變株(△hslUV)中,這類(lèi)蛋白增加尤為顯著。采用相對(duì)和絕對(duì)定量同位素標(biāo)記(iTRAQ)技術(shù)和多維液相色譜聯(lián)用(LC-MS/MS)技術(shù)對(duì)感染過(guò)程中鉤體胞內(nèi)變性蛋白進(jìn)行了鑒定,隨后的KEGG通路和GO分析結(jié)果顯示這些變性蛋白主要涉及問(wèn)號(hào)鉤體的核糖體組裝、鞭毛裝配、二元信號(hào)系統(tǒng)和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程。與野生株相比,△hslUV突變株在感染巨噬細(xì)胞過(guò)程中表現(xiàn)為死亡率升高、生長(zhǎng)

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