和厚樸酚逆轉(zhuǎn)CNE2-DDP細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤耐藥性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]
　　 探討HNK對(duì)人鼻咽癌多藥耐藥細(xì)胞CNE2/DDP裸鼠皮下移植瘤多藥耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及相關(guān)機(jī)制。
　　 [方法]
　　 (1)體外培養(yǎng)CNE2/DDP細(xì)胞，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)研究。
　　 (2)建立CNE2/DDP細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型。
　　 (3)40只裸鼠成瘤后隨機(jī)分成5組，每組8只，分別是生理鹽水對(duì)照組：予以生理鹽水10ml/(kg.d)；溶劑組：予以溶劑10ml/(

2、kg.d)；HNK組：予以HNK100mg/(kg.d)；DDP組：予以DDP2mg/(kg.d)；HNK+DDP組：予以HNK100mg/(kg.d)+DDP2mg/(kg.d)。其中，DDP每三天給藥一次，其他藥物每天一次，共計(jì)18天。
　　 (4)觀察荷瘤裸鼠的皮毛、食欲、活動(dòng)狀況、對(duì)刺激的反應(yīng)、腫瘤的生長(zhǎng)情況，評(píng)價(jià)化療毒副反應(yīng)和生存質(zhì)量。
　　 (5)采用HE染色，光鏡下觀察各組移植瘤組織的病理形態(tài)學(xué)變化。

3、>　　 (6)免疫組化SP法檢測(cè)各組移植瘤組織中蛋白P-gp、LRP、Bcl-2和Bax的表達(dá)。
　　 [結(jié)果]
　　 (1)生理鹽水組、溶劑組、和厚樸酚組、順鉑組、和厚樸酚+順鉑組給藥結(jié)束后裸鼠移植瘤的體積分別為1.653±0.225cm3、1.502±0.308 cm3、1.478±0.337 cm3、1.370±0.281 cm3、1.089±0.190 cm3，與生理鹽水組相比，溶劑組、和厚樸酚組腫瘤體積差異無(wú)

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，順鉑組瘤體較小(P<0.05)，和厚樸酚+順鉑組瘤體更小(P<0.01)。
　　 (2)生理鹽水組、溶劑組、和厚樸酚組、順鉑組、和厚樸酚+順鉑組給藥結(jié)束后裸鼠移植瘤的瘤重分別為1.582±0.145g、1.445±0.227g、1.407±0.257g、1.301±0.124g、1.018±0.067g，與生理鹽水組相比，順鉑組、和厚樸酚+順鉑組移植瘤重較輕(P<0.05，P<0.01)，而溶劑組及和

5、厚樸酚單獨(dú)給藥組的瘤重與生理鹽水組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。順鉑組、和厚樸酚+順鉑組對(duì)荷瘤裸鼠的抑瘤率分別為17.76％、35.69％。
　　 (3)通過(guò)對(duì)腫瘤組織HE染色的觀察，可見對(duì)照組腫瘤體積大，異型性明顯，聯(lián)合用藥組胞核深染，核仁不明顯。
　　 (4)免疫組化SP法檢測(cè)：與對(duì)照組相比，和厚樸酚單獨(dú)給藥組及和厚樸酚+順鉑聯(lián)合用藥組腫瘤組織的P-gp，LRP蛋白的表達(dá)顯著降低(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義；而溶劑組和順鉑組與對(duì)照組相比，其腫瘤組織中以上兩種蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)。
　　 (5)免疫組化SP法檢測(cè)：與對(duì)照組相比，和厚樸酚單獨(dú)用藥組、順鉑組及和厚樸酚+順鉑組腫瘤組織的Bcl-2蛋白的表達(dá)顯著降低(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且聯(lián)合用藥組腫瘤組織中Bcl-2表達(dá)較和厚樸酚單獨(dú)給藥組及順鉑組更低(P<0.05)。而溶劑組與對(duì)照組相比，其腫瘤組織中Bcl-2蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)。

7、　　 (6)免疫組化SP法檢測(cè)：與對(duì)照組相比，順鉑組及和厚樸酚+順鉑組腫瘤組織的Bax蛋白的表達(dá)顯著升高(P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而溶劑組和HNK組與對(duì)照組相比，其腫瘤組織中Bax蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)；與順鉑組相比，聯(lián)合用藥組該蛋白的表達(dá)更高(P<0.01)。
　　 [結(jié)論]
　　 (1)HNK可以部分逆轉(zhuǎn)人鼻咽癌細(xì)胞CNE2/DDP荷瘤裸鼠皮下移植瘤的耐藥性。
　　 (2)HNK逆轉(zhuǎn)裸