凋亡相關(guān)基因FAS及其配體FASL基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EM)是具有生長(zhǎng)功能的子宮內(nèi)膜組織，出現(xiàn)在子宮腔被覆粘膜以外的其他部位的一種具有惡性行為的良性病變，是生育期婦女的常見病和多發(fā)病。目前EM的發(fā)病機(jī)制尚不明確。近年來，隨著對(duì)細(xì)胞凋亡(apoptosis)發(fā)生的分子機(jī)制的研究，發(fā)現(xiàn)FAS與FASL結(jié)合介導(dǎo)的促細(xì)胞凋亡作用是重要的凋亡信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)之一，在調(diào)節(jié)正常子宮內(nèi)膜組織的增殖平衡和結(jié)構(gòu)重建中起重要作用。多種腫瘤組織中存在FAS的低表達(dá)和F

2、ASL的高表達(dá)，這種異常表達(dá)可能與癌細(xì)胞的種植和轉(zhuǎn)移有關(guān)。子宮內(nèi)膜異位癥的某些生物學(xué)行為諸如:浸潤(rùn)、種植、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，與周圍組織嚴(yán)重粘連及對(duì)其他組織或器官侵襲和破壞，與惡性腫瘤極其相似。在異位子宮內(nèi)膜中也檢測(cè)到FAS的低表達(dá)和FASL的高表達(dá)，提示它們?cè)贓M的發(fā)生發(fā)展中起一定作用。研究表明，F(xiàn)AS基因啟動(dòng)子-1377G/A和-670A/G與FASL基因啟動(dòng)子區(qū)-844T/C這三個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)（singlenucleotidepoly

3、morphism，SNP），可通過改變基因的轉(zhuǎn)錄活性而影響FAS和FASL蛋白的表達(dá)，且與腫瘤的遺傳易感性相關(guān)。本研究探討這三個(gè)基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)位點(diǎn)與中國(guó)北方婦女子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。
　　 方法:采用病例-對(duì)照研究方法，收集486例內(nèi)異癥患者和493例對(duì)照組婦女的靜脈抗凝血5ml，采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測(cè)反應(yīng)(polymerasechainreaction-

4、ligasedetectionreaction，PCR-LDR)分型方法檢測(cè)FAS-1377G/A、-670A/G和FASL-844T/C3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的基因型頻率分布。
　　 采用SPSS13.0版軟件包(SPSSCompany，Chicago，Illinois，USA)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析?；蛐皖l率的預(yù)期值與觀察值采用卡方檢驗(yàn)比較，并進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析。等位基因、基因型頻率在病例組和對(duì)照組分布采用行×列表的x2

5、檢驗(yàn)進(jìn)行比較。采用非條件Logistic回歸模型的方法計(jì)算相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比(oddsratio，OR)及其95％可信區(qū)間(confidenceinterval，CI)。應(yīng)用EH和2LD軟件對(duì)FAS基因多態(tài)位點(diǎn)的單體型頻率和等位基因連鎖不平衡狀態(tài)進(jìn)行分析。以P＜0.05作為差異有顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1、對(duì)照組FAS-1377G/A，-670A/G與FASL-844T/C3個(gè)SNP的基因型頻率分布均符合Ha

6、rdy-Weinberg平衡（P值均＞0.05）。
　　 2、FAS基因-1377G/ASNP在內(nèi)異癥組及對(duì)照組的G和A等位基因頻率分別為69.8％、30.2％和71.1％、28.9％，G/G、G/A、A/A3種基因型頻率分別為48.6％、42.4％、9.0％和50.3％、41.6％、8.1％，F(xiàn)AS-1377G/A多態(tài)位點(diǎn)的等位基因頻率和基因型頻率分布在EM組與對(duì)照組之間，無顯著差異（P＞0.05）;與G/G基因型比較，攜帶G

7、/A或A/A基因型未顯著改變內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=0.93，95％CI=0.73-1.20)。
　　 3、FAS基因-670A/GSNPA和G等位基因頻率在EM組和對(duì)照組分別為66.0％、34.0％和65.0％、35.0％，兩組相比無顯著差異(P＞0.05);A/A、A/G、G/G3種基因型頻率分布在EM(43.8％、44.5％、11.7％)和對(duì)照組(40.8％、48.5％、10.7％)間也無顯著差異（P＞0.05）;與A/A

8、基因型攜帶者相比，攜帶A/G或G/G基因型未明顯改變內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.13,95％CI=0.88-1.46)。
　　 4、FASL基因-844T/CSNPC和T等位基因頻率在EM組和對(duì)照組分別為75.9％、24.1％和74.6％、25.4％，兩組間無顯著差異;C/C、C/T、T/T3種基因型頻率分布在EM組與對(duì)照組分別為58.2％、35.4％、6.4％和56.8％、35.7％、7.5％，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)

9、。與C/C基因型比較，攜帶C/T或T/T基因型未顯著改變內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.06，95％CI=0.82-1.37)。
　　 5、FAS-1377G/ASNPG等位基因和-670A/GSNPA等位基因存在強(qiáng)連鎖不平衡現(xiàn)象(D'=0.999998，P＜0.001)。但是FAS基因-1377G/A、-670A/GSNP的單體型分布在EM患者組和對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 6、FAS和FASL基因