子宮內(nèi)膜異位癥患者ACE、AT1R基因多態(tài)性分析.pdf

1、目的：子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis，EMs)是一種常見的婦科良性疾病，近年來發(fā)病率呈遞增趨勢。但其發(fā)生發(fā)展的機(jī)理還不十分明確。研究發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。而子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病有一定的遺傳基礎(chǔ)和家族聚集傾向，從而提出了子宮內(nèi)膜異位癥的遺傳易感性，即人與人之間個(gè)體的基因差異造成了對子宮內(nèi)膜異位癥的易感性不同。國內(nèi)外已經(jīng)對基因變異與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系作了許多研究，如子宮內(nèi)膜異位癥與雌激素受體、

2、整合素等基因多態(tài)性的研究。子宮內(nèi)膜異位癥雖是一種良性病變，但具有許多惡性腫瘤的特征，例如局部浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。同腫瘤相同，內(nèi)膜碎片要在子宮內(nèi)膜以外的組織種植、生長并浸潤周圍組織必須有豐富的血液供應(yīng)。子宮內(nèi)膜組織中有顯著的血管形成現(xiàn)象。腎素—血管緊張素一醛固酮系統(tǒng)(Renin-Angiotensin-Aldosterone Systen，RAS)是體內(nèi)調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)、體液平衡和血壓的重要系統(tǒng)。其主要組成有：腎素(由腎臟的近球細(xì)胞產(chǎn)生)作用于

3、血管緊張素原(肝合成)生成血管緊張素I(angiotensinⅠ，ANGⅠ)，后者在血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensinⅠ convertingenzyme，ACE)的作用下生成血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，ANG Ⅱ)，后者是RAS的核心，它與其受體(angiotensin Ⅱtype 1 recep tor,AT1R)結(jié)合參與調(diào)節(jié)局部血流和血管緊張性，促進(jìn)血管平滑肌的生長和代謝，與新血管形成有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)血管緊張素轉(zhuǎn)換

4、酶(ACE)基因A2350G、血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)基因A2350G多態(tài)性與心血管疾病相關(guān)聯(lián)，RAS可調(diào)節(jié)新血管的形成，這可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)理。本試驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接慉CE基因A2350G、AT1R基因A1166C多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥的遺傳易感性之間的關(guān)系。 方法：病例組：選擇自2006年10月至2007年9月，在河北醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科經(jīng)開腹或腹腔鏡手術(shù)切除，并經(jīng)大體和病理檢查確診為子宮內(nèi)膜異位癥患者

5、78例(據(jù)AFS修訂的子宮內(nèi)膜異位癥分期法進(jìn)行評分，均為Ⅲ、Ⅳ期)。對照組：選擇同期在我院行輸卵管復(fù)通術(shù)、因不孕癥、縱隔子宮等行腹腔鏡檢查、畸胎瘤、卵巢單純囊腫行腹腔鏡或開腹手術(shù)的患者82例，術(shù)中排除子宮內(nèi)膜異位癥。兩組血壓正常，均排除明顯的心血管疾病、糖尿病、腎病及惡性腫瘤。兩組對象均為河北省漢族人，無血緣關(guān)系。采取試驗(yàn)對象的肘靜脈血1-2ml，EDTA抗凝，提取全基因組DNA，分別用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)擴(kuò)增包括ACE基因A2

6、350G、AT1R基因A1166C多態(tài)位點(diǎn)的基因片段，再將各目的基因加入相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行消化，酶切產(chǎn)物在8％的PAGE膠上加100V電壓電泳60-90min，紫外分析儀觀察酶切結(jié)果，根據(jù)產(chǎn)物的大小判斷每例樣本的基因型，用直接計(jì)數(shù)法計(jì)算出各等位基因的表型頻率，進(jìn)行X2檢驗(yàn)，看是否符合Hard-Weinberg遺傳平衡定律，用X2檢驗(yàn)及OR值分析ACE基因A2350G、AT1R基因A1166C多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系，應(yīng)用SPSS

7、13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果： 1.對子宮內(nèi)膜異位癥組和對照組ACE基A2350G、AT1R基因A1166C基因型頻率進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)，結(jié)果示P>0.05。表明已達(dá)遺傳平衡。 2.ACE基因A2350G的三種基因型：AA/AG/GG在病例組的攜帶率分別49(62.8％)、27(34.6％)、2(2.6％)，在對照組分別為71(86.6％)、10(12.2％)、1(1.2％)，兩組間差異有統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)意義(X2=12.041，P=0.01)，OR為3.820(95％CI為1.745-8.364)。說明ACE基因A2350G多態(tài)性與Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥具有相關(guān)性。其中A/G等位基因在病例組的分布頻率為80.1/19.9％，在對照組為：92.7/7.3％。兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=10.616，P=0.01)。計(jì)算其基因變異型與Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，OR=3.227(95％CI為1.550-6.717)。說明235

9、0*G基因型及等位基因是Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的危險(xiǎn)因素。 3.ATlR基因A1166C的三種基因型：AA/AC/CC在病例組的攜帶率分別為67(85.9％)、11(14.1％)、0(0％)，在對照組的攜帶人數(shù)分別為：72(87.8％)、10(12.2％)、0(0％)。兩組間差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=0.128，P=0.721)。OR=1.182(95％CI為0.472-2.962)。說明沒有發(fā)現(xiàn)AT1R基因多態(tài)性與Ⅲ、Ⅳ期

10、子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生具有相關(guān)性。其中A/C等位基因在病例組的分布頻率為92.9/7.1％，在對照組為：93.9/6.1％，兩組間差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=0.119，P=0.823)。計(jì)算其基因變異型與Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，OR=1.168(95％CI為0.482-2.833)。沒有發(fā)現(xiàn)A/C基因型與Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生有相關(guān)性。 結(jié)論： 1.ACE基因A2350G多態(tài)性與中國河北孕齡期婦女患Ⅲ、Ⅳ子

11、宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系：說明攜帶ACE 2350*G等位基因患Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥的危險(xiǎn)性增加。ACE基因多態(tài)性可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)理。本試驗(yàn)結(jié)果與Yao-Yuan Hsieh等的研究結(jié)果一致。 2.AT1R基因A1166C多態(tài)性與中國河北孕齡婦女患Ⅲ、Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系：AT1R基因A1166C A/C等位基因在子宮內(nèi)膜異位癥組和對照組的分布沒有顯著性差異。說明AT1R基因多態(tài)性可能不是子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的獨(dú)立危