新型2’-脫氧-2’-氟-2’-C-甲基核苷類似物的合成和抗HCV活性研究.pdf

1、核苷及其類似物在藥物化學(xué)領(lǐng)域占有非常重要的地位，尤其是在治療腫瘤和病毒性疾病方面得到了廣泛的應(yīng)用，目前，美國(guó)食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)的用于治療HIV、HBV、HCV和HSV感染的近40種藥物中，接近一半是核苷類藥物。
　　目前，全世界大約有1.7-2億人感染了丙肝病毒，是艾滋病病毒感染者的5倍，然而，還沒(méi)有預(yù)防HCV感染的疫苗問(wèn)世，也沒(méi)有用于慢性丙肝的廣泛和有效的治療方法。HCV RdRp是NS5B蛋白的一部分，它負(fù)責(zé)病毒基因

2、組的復(fù)制，這種病毒的生化活性不存在于哺乳動(dòng)物的宿主細(xì)胞中，因此，NS5B是選擇性HCV抑制劑的很好的靶標(biāo)?，F(xiàn)在，已經(jīng)有幾種核苷類HCV NS5B RdRp抑制劑進(jìn)入臨床試驗(yàn)。
　　由于氟原子獨(dú)特的性質(zhì)，在核苷中引入氟原子可能會(huì)帶來(lái)生物活性方面的巨大變化，糖基的2'，3'-位被氟取代還可以提高核苷的化學(xué)穩(wěn)定性，尤其是在酸性條件下的穩(wěn)定性，而且氟取代基也可以提高代謝的穩(wěn)定性。比如胸苷的2'-β-氫原子被氟取代得到的FMAU以及3'-羥

3、基被氟取代的化合物FLT都表現(xiàn)出很好的抗病毒活性。因此，氟代核苷的研究吸引了很大的關(guān)注。
　　1.目標(biāo)化合物的設(shè)計(jì)
　　許多2'-β-C-甲基核苷類似物有抗HCV活性，如2'-C-甲基胞苷，它的2'-氟代衍生物有比它更強(qiáng)的抑制丙肝病毒的作用和更低的細(xì)胞毒性，2'-C-甲基4-氨基-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶核苷也是潛在的、無(wú)細(xì)胞毒性的HCV RNA聚合酶抑制劑，研究它的2'-氟代衍生物的抗HCV活性很有意義。
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4、.目標(biāo)化合物的合成
　　以氰乙酸乙酯和溴乙縮醛為原料經(jīng)過(guò)六步反應(yīng)合成了4-氯-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶;
　　以D-木糖為原料，通過(guò)保護(hù)、脫保護(hù)、氧化、還原等方法共九步反應(yīng)合成了3，5-二-O-芐基-1，2-二-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖;
　　4-氯-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶和3，5-二-O-芐基-1，2-二-O-乙?；?β-D-呋喃核糖以TMSOTf為Friedel-Crafts催化劑通過(guò)Silyl-Hi

5、lbert-Johnson反應(yīng)形成核苷，然后經(jīng)過(guò)脫保護(hù)、氧化、甲基化、氟化、氨化等方法合成2'-脫氧-2'-氟-2'-C-甲基-4-氨基-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶核苷25;
　　合成2'-脫氧-2'-氟-2'-C-甲基-4-氨基-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶核苷三磷酸26。
　　3.抗HCV活性試驗(yàn)
　　測(cè)試2'-脫氧-2'-氟-2'-C-甲基-4-氨基-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶核苷25在Ava.5細(xì)胞、293

6、-Sip-L細(xì)胞和Huh7.5細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)抗HCV活性，結(jié)果顯示，2'-脫氧-2'-氟-2'-C-甲基-4-氨基-5-氟吡咯[2,3-d]嘧啶核苷有較好的抗HCV活性，并且對(duì)正常細(xì)胞沒(méi)有毒性。2'-脫氧-2'-氟-2'-C-甲基-4-氨基-5-氟吡咯[2，3-d]嘧啶核苷三磷酸26在Huh7.5細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)有較好的抗HCV活性，對(duì)正常細(xì)胞沒(méi)有毒性。
　　總之，本文成功的設(shè)計(jì)并合成了2'-脫氧-2'-氟-2'-C-甲基-4-氨基-5-氟