Z0206細(xì)菌富硒多糖對(duì)糖尿病KKAy小鼠腎臟和脂肪組織炎癥的影響.pdf

1、本研究建立在課題組自行研制得到的Z0206細(xì)菌富硒多糖(EPS)對(duì)Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠糖脂代謝影響的研究基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究其對(duì)Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠腎臟組織炎癥和脂肪組織炎癥的緩解作用及相關(guān)作用機(jī)制。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1 Z0206細(xì)菌富硒多糖緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠腎臟組織炎癥的作用
　　本試驗(yàn)選用6-8周齡KKAy雄性小鼠，按血糖高低，隨機(jī)分為2組:模型組(Model)和Z0206富硒細(xì)菌多糖組(E

2、PS)，同時(shí)以C57/BL小鼠作為正常對(duì)照組(Control)，試驗(yàn)持續(xù)42 d，采集腎臟組織。
　　抗氧化指標(biāo)結(jié)果顯示:與模型組相比，EPS顯著提高了KKAy小鼠腎臟組織的谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-P x)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性(P＜0.05)，顯著降低了丙二醛(MDA)含量(P＜0.05)。結(jié)果提示，EPS能夠提高糖尿病KKAy小鼠腎臟組織的抗氧化水平。
　　組織形態(tài)觀察結(jié)果顯示:與模型組相比，EPS明顯改善

3、了KKAy小鼠腎臟組織的腎小球結(jié)構(gòu)損傷、系膜基質(zhì)增生、足細(xì)胞凋亡、線粒體嵴不完整、小管基底膜較厚等癥狀。結(jié)果提示，EPS能夠緩解糖尿病KKAy小鼠腎臟組織的結(jié)構(gòu)病變。
　　炎癥因子及病變因子結(jié)果顯示:與模型組相比，EPS顯著降低了KKAy小鼠腎臟組織的白細(xì)胞介素1β（IL1β）、白細(xì)胞介素6(IL6)、單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)、核因子-κB(NF-κB)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGFβ)、纖溶酶原激活物抑制物1(PAI1)、血小板衍

4、生生長(zhǎng)因子β(PDGFβ)和Ⅳ型膠原（Col-Ⅳ）mRNA表達(dá)量(P＜0.05)。結(jié)果提示，EPS能夠有效緩解糖尿病引起的腎臟組織炎癥和腎小球硬化。
　　以上結(jié)果提示，EPS能夠通過(guò)提高KKAy小鼠腎臟組織的抗氧化水平，改善KKAy小鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)病變，抑制促炎因子和病變因子的表達(dá)，從而緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠腎臟組織的炎癥。
　　2 Z0206細(xì)菌富硒多糖緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠脂肪組織炎癥的作用
　　試驗(yàn)方法同

5、上，采集脂肪組織。炎癥因子及脂肪分解關(guān)鍵酶結(jié)果顯示:與模型組相比，EPS顯著降低了KKAy小鼠脂肪組織IL1β、IL6、腫瘤壞死因子α(TNFα)、甘油三酯水解酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL) mRNA表達(dá)量(P＜0.05)，顯著升高了白細(xì)胞介素10(IL10) mRNA表達(dá)量(P＜0.05)。結(jié)果提示，EPS能夠抑制糖尿病KKAy小鼠脂肪組織炎癥及脂肪分解。
　　葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)果表明:與模型組相比，EPS顯著提高了KKA

6、y小鼠脂肪組織的AMPKα1、pAMPKα1、Sirt1和Glut4蛋白表達(dá)量。結(jié)果提示，EPS能夠顯著提高糖尿病KKAy小鼠脂肪組織AMPK、Sirt1通路活性以及葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)能力。
　　以上結(jié)果提示，EPS能夠通過(guò)影響KKAy小鼠脂肪組織的炎癥因子及脂肪分解關(guān)鍵酶，提高AMPK、Sirt1通路活性以及葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)能力，從而緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠脂肪組織的炎癥。
　　3 Z0206細(xì)菌富硒多糖緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠脂肪

7、組織炎癥的機(jī)制研究
　　本試驗(yàn)采用體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，通過(guò)胰島素處理3T3-L1脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)胰島素抵抗模型，探究EPS緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠脂肪組織炎癥的可能機(jī)制。
　　干擾載體構(gòu)建結(jié)果表明:在3T3-L1脂肪細(xì)胞中，干擾AMPKα1，與空白對(duì)照相比，AMPKα1蛋白表達(dá)顯著降低;干擾Sirt1，與空白對(duì)照相比，Sirt1蛋白表達(dá)顯著降低。結(jié)果提示，AMPKα1和Sirt1干擾載體構(gòu)建成功。
　　炎癥因子及蛋白表達(dá)結(jié)果表

8、明:EPS顯著降低了胰島素引起的IL6和TNFαmRNA的表達(dá)增量(P＜0.05)，顯著提高了Glut4、AMPKα1、pAMPKα1和Sirt1蛋白表達(dá)及葡萄糖吸收（P＜0.05）。結(jié)果提示，EPS能夠在細(xì)胞水平上緩解胰島素抵抗引起的炎癥，提高葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)能力。
　　AMPKα1和Sirt1干擾結(jié)果表明:分別干擾AMPKα1或Sirt1表達(dá)后，EPS對(duì)IL6和TNFαmRNA表達(dá)量的降低作用顯著減弱(P＜0.05)，同時(shí)，EPS

9、促進(jìn)葡萄糖吸收的作用也顯著降低（P＜0.05）。結(jié)果提示，EPS可能通過(guò)AMPK和Sirt1信號(hào)通路發(fā)揮脂肪抗炎作用。
　　以上結(jié)果提示，EPS能夠在細(xì)胞水平上緩解胰島素抵抗引起的炎癥，促進(jìn)細(xì)胞對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)一步證明EPS可能通過(guò)AMPK和Sirt1信號(hào)通路發(fā)揮作用。
　　綜上所述，本研究證明:EPS能夠緩解Ⅱ型糖尿病KKAy小鼠腎臟組織炎癥及結(jié)構(gòu)病變，還能緩解KKAy小鼠脂肪組織的炎癥及脂肪分解，并進(jìn)一步證明了EPS可