RASSF1A基因去甲基化對人鼻咽癌裸鼠移植瘤的生長抑制作用及其機理研究.pdf

1、[目的]
　　 RASSF1A基因是一種重要的腫瘤抑制基因，在人類許多實體腫瘤中，其啟動子CpG島區(qū)域常常會發(fā)生高甲基化而導致其轉錄沉默。5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine，5-Aza-CdR)能使因甲基化而失活的腫瘤抑制基因重新激活，進而抑制腫瘤的生長。本實驗通過觀察5-Aza-CdR對體外培養(yǎng)的人低分化鼻咽癌細胞(CNE-2Z)和體內裸鼠移植瘤的生長抑制作用與影響，進一步探索RASSF1A

2、基因是否在人低分化鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。同時，探討該藥物的抗腫瘤效應，為臨床治療鼻咽癌提供新的作用靶點。
　　 [方法]
　　 1.利用MSP、RT-PCR和免疫細胞化學等方法檢測CNE-2Z細胞RASSF1A基因的甲基化水平及轉錄表達情況。
　　 2.建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型，觀察5-Aza-CdR處理組和對照組裸鼠體內腫瘤的生長、侵襲和轉移等情況。
　　 3.利用MSP、RT-PCR和免疫組

3、織化學等方法進一步檢測裸鼠移植瘤組織內RASSF1A基因的甲基化水平及轉錄表達情況。
　　 [結果]
　　 1.體外細胞培養(yǎng)實驗：
　　 對照組CNE-2Z細胞內RASSF1A基因啟動子CpG島區(qū)域呈高甲基化，用5-Aza-CdR處理CNE-2Z細胞后RASSF1A基因的高甲基化水平降低，RASSF1A基因蛋白表達增加。
　　 2.裸鼠移植瘤實驗
　　 1)用藥組平均瘤重為1.237±0.809g

4、，比對照組平均瘤重2.512±1.566g明顯降低(P<0.05)。
　　 2)用藥組侵襲轉移率為15.00％；對照組侵襲轉移率為15.38％。兩組結果無明顯差別。
　　 3)對照組瘤組織的RASSF1A基因啟動子CpG島區(qū)域均存在高甲基化，應用5-Aza-CdR后，RASSF1A基因的高甲基化水平降低，RASSF1A基因蛋白表達水平增加。
　　 [結論]
　　 1.RASSF1A基因在體外CNE-2Z細