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1、目的:聯(lián)合應(yīng)用攜帶mda-7基因的腺病毒Ad.mda-7與DTIC,觀察其對(duì)人A375黑素瘤裸鼠移植瘤的治療效果,為臨床治療黑素瘤奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
方法:建立裸鼠黑素瘤移植瘤模型,隨機(jī)分為4組,每組8只,分別給予PBS、Ad.mda-7單獨(dú)治療、DTIC單獨(dú)治療、Ad.mda-7聯(lián)合DTIC治療。病毒注射后第7天每組隨機(jī)處死4只動(dòng)物,RT-PCR法檢測(cè)MDA-7 mKNA表達(dá),免疫印跡法檢測(cè)MDA-7蛋白表達(dá)情況,TUNEL
2、法檢測(cè)腫瘤組織凋亡,免疫組化法檢測(cè)BAX、Bcl-2、VEGF蛋白表達(dá)。余動(dòng)物繼續(xù)測(cè)量腫瘤體積繪制腫瘤生長(zhǎng)抑制曲線,在治療第30天時(shí)處死動(dòng)物,稱量移植瘤瘤重。
結(jié)果:RT-PCR法與免疫印跡法顯示Ad.mda-7單用或與DTIC聯(lián)合應(yīng)用都可使腫瘤組織表達(dá)MDA-7 mRNA和MDA-7蛋白,兩治療組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,DTIC不影響MDA-7蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯:TUNEL檢測(cè)顯示聯(lián)合治療組的凋亡指數(shù)明顯高于各單獨(dú)應(yīng)用組(P<
3、0.05)和PBS組(PO<0.05);免疫組化顯示Ad.mda-7與DTIC都可以上調(diào)BAX的表達(dá)、下調(diào)Bcl-2表達(dá),抑制VEGF表達(dá),與單獨(dú)應(yīng)用相比二者聯(lián)合應(yīng)用產(chǎn)生的作用更為顯著(P<0.05);腫瘤生長(zhǎng)曲線顯示Ad.mda-7與DTIC聯(lián)合應(yīng)用具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的效果,與DTIC單獨(dú)應(yīng)用相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.022);Ad.mda-7組瘤重與DTIC組瘤重均小于PBS組(P<0.05),聯(lián)合治療組瘤重分別小于二者單用組(P
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