香煙煙霧提取物聯(lián)合UVB照射對人皮膚成纖維細胞端粒長度和端粒酶活性的影響.pdf

1、目的:通過觀察香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract, CSE)聯(lián)合UVB照射對人皮膚成纖維細胞端粒長度和端粒酶活性的影響，進一步探討在吸煙過程中產生的煙霧及紫外線照射在促使皮膚發(fā)生老化的作用。
　　方法:采用細胞舊液與細胞新液按1∶2比例的方法培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞并繪制生長曲線;MTT法檢測CSE對人皮膚成纖維細胞增殖的影響;用三種不同濃度的CSE和UVB照射（30mJ/cm2）處理人皮膚成纖維細胞后采用

2、實時定量聚合酶鏈反應技術(RT-PCR)檢測端粒長度的變化，同時采用聚合酶鏈反應-酶聯(lián)免疫吸附試驗(PCR-ELISA)方法檢測端粒酶活性的變化情況。
　　結果:采用細胞舊液與細胞新液按1∶2比例的方法培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞與常規(guī)培養(yǎng)方法相比較，其倍增時間相對較短，其潛伏期為0-1d，生長期為2-4d，第4d之后細胞增殖緩慢，進入一個比較穩(wěn)定的平臺期;常規(guī)培養(yǎng)細胞的方法:潛伏期為0-2d，生長增殖期為2-5d，第5d之后則進入穩(wěn)定的

3、平臺期;CSE對人皮膚成纖維細胞的增殖在低濃度（＜37.5μL/mL)時具有促進作用，在高濃度(＞75μL/mL)時具有抑制作用，但與未加CSE組相比較，差異均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05); UVB照射組和CSE聯(lián)合UVB照射處理組人皮膚成纖維細胞的端粒長度與端粒酶活性的變化情況與未處理組差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)，且隨著CSE濃度的增加，端粒長度與端粒酶活性的變化情況越明顯。
　　結論:采用按細胞舊液與細胞新液比例為1∶