生長抑素受體顯像監(jiān)測基因治療的實驗研究.pdf

1、目的：構(gòu)建含單純皰疹病毒1型胸苷激酶(HSV1-tk)基因和人生長抑素2a型受體(hSSTr2a)基因的雙順反子重組腺病毒載體(Ad5-TIS)，并感染腫瘤細(xì)胞和動物模型。通過一系列體外和體內(nèi)實驗研究，來探討生長抑素受體顯像用于監(jiān)測自殺基因HSV1-tk表達(dá)水平和預(yù)測HSV1-tk/GCV抑瘤效應(yīng)的可行性。 結(jié)論：在腫瘤細(xì)胞和荷瘤模型中，雙順反子重組腺病毒載體攜帶的hSSTr2a基因和HSV1-tk基因得到有效的共表達(dá)。在GCV

2、的聯(lián)合作用下，治療基因HSV1-tk可發(fā)揮抑瘤功能。利用生長抑素受體報告基因系統(tǒng)，可以間接監(jiān)測自殺基因的表達(dá)，并預(yù)測HSV1-tk聯(lián)合GCV治療腫瘤的效果。 第一部分99mTc-HYNIC-TOCA和99mTc-P829在腫瘤生長抑素受體顯像中的對比研究 目的：研究99mTc標(biāo)記的生長抑素類似物(somatostatinanalogues，SSA)99mTc-6-肼基煙?；?[Tyr3]-Octreotate(99mTc

3、-HYNIC-TOCA)在腫瘤動物模型體內(nèi)的生物學(xué)特性，并與商品化的生長抑素受體顯像劑99mTc-P829對比，探討其用于腫瘤診斷的可行性。 結(jié)論：同99mTc-P829相比，99mTc-HYNIC-TOCA除同樣有腎臟排泄為主和血液清除快的特點以外，更具備腫瘤攝取高和肝臟濃聚低的良好生物學(xué)特性，在高表達(dá)生長抑素受體腫瘤的定位診斷中有良好的應(yīng)用前景。 第二部分:重組雙順反子腺病毒載體Ad5-TIS在人肺腺癌細(xì)胞中的表達(dá)

4、 目的：構(gòu)建含HSV1-tk基因和人生長抑素2a型受體(hSSTr2a)基因的雙順反子重組腺病毒載體(Ad5-TIS)，并感染腫瘤細(xì)胞，檢測兩目的基因的表達(dá)情況。 結(jié)論：雙順反子重組腺病毒載體Ad5-TIS攜帶的報告基因hSSTr2a和治療基因HSV1-tk，在腫瘤細(xì)胞中得到有效的共表達(dá)。 第三部分生長抑素受體顯像監(jiān)測雙順反子腺病毒載體Ad5-TIS在腫瘤中的表達(dá) 目的：以含單純皰疹病毒1型胸苷激酶(HSV

5、1-tk)基因和人生長抑素2a型受體(hSSTr2a)基因的雙順反子重組腺病毒載體(Ad5-TIS)感染腫瘤細(xì)胞和動物模型。通過對表達(dá)報告基因hSSTr2a的動物模型進行受體顯像，來監(jiān)測自殺基因HSV1-tk的表達(dá)水平。 結(jié)論：雙順反子重組腺病毒載體攜帶的報告基因hSSTr2a和治療基因HSV1-tk，在腫瘤細(xì)胞和荷瘤模型中得到有效的共表達(dá)。通過生長抑素受體顯像，可以對報告基因和治療基因的表達(dá)水平分別進行直接和間接的監(jiān)測。

6、 第四部分生長抑素受體報告基因系統(tǒng)預(yù)測HSV1-tk聯(lián)合GCV治療對腫瘤的殺傷效應(yīng) 目的：用雙順反子重組腺病毒載體(Ad5-TIS)感染腫瘤細(xì)胞和動物模型，并給予GCV治療。以生長抑素受體特異性配體99mTc-HYNIC-TOCA為探針，通過細(xì)胞攝取實驗和動物顯像來評價目的基因的表達(dá)水平，并分析其與GCV療效之間的關(guān)系，為利用生長抑素受體報告基因系統(tǒng)預(yù)測HSV1-tk的腫瘤殺傷效應(yīng)提供依據(jù)。 結(jié)論：雙順反子重組腺病毒載