血漿miR-26b和miR-30a對(duì)高血壓性左室肥厚和肥厚型心肌病診斷價(jià)值的研究.pdf

1、研究背景：
　　高血壓性心臟病是指因長(zhǎng)期血壓控制不佳而引起的左心室肥厚和左心室舒張功能減退，進(jìn)而進(jìn)展為心力衰竭的疾病。高血壓性左心室肥厚（Hypertensive left ventricular hypertrophy，HTN-LVH）是高血壓性心臟病的特征性表現(xiàn)之一。肥厚型心肌?。℉ypertrophic Cardiomyopathy，HCM）是一種遺傳性心肌病，特征為心室壁呈不對(duì)稱性肥厚，主要表現(xiàn)為室間隔肥厚，但也存在左心室

2、肥厚，因此臨床中HCM與HTN-LVH有時(shí)也難以鑒別。眾所周知，左心室肥厚是高血壓病導(dǎo)致的常見靶器官損害之一，研究顯示左心室肥厚還是心腦血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[1]，此外，左心室肥厚的發(fā)生發(fā)展常導(dǎo)致心力衰竭和猝死等不良的預(yù)后結(jié)果。因此，左室心肌肥厚的早期診斷和有效防治顯得尤其重要。近年來(lái)，微小RNA（microRNAs，miRNAs）成為心血管領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，miRNAs在心血管疾病病理生理過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用[2]，它參與了心臟

3、重構(gòu)、心臟發(fā)育、冠脈血管病變、心律失常等過程。眾多的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明miR-26a、miR-26b、miR-30a和miR-34a等參與調(diào)控心肌肥厚的過程，并且發(fā)現(xiàn)HTN-LVH患者的血漿miR-30a水平與室間隔舒張末期厚度（Interventricular septal thickness at end-diastole，IVSd）和左心室后壁舒張末期厚度（Left ventricular posterior wall thickn

4、ess at end-diastole，LVPWd）呈正相關(guān)，且血漿中的miR-30a可能是左心室肥厚診斷的重要指標(biāo)[3-7]。此外，有研究對(duì)2種不同心肌肥厚模型的小鼠心肌組織miRNAs表達(dá)譜進(jìn)行芯片技術(shù)篩查，發(fā)現(xiàn)miR-30a和miR-30e在主動(dòng)脈縮窄致心肌肥厚模型組的肥厚心肌組織中表達(dá)下調(diào)，而在基因突變心肌肥厚模型組中miR-30a和miR-30e表達(dá)是上調(diào)的[8]，這為利用miRNAs表達(dá)的差異來(lái)鑒別不同原因所致的心肌肥厚提供

5、了方向。但這些研究多局限于在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中，目前在左心室肥厚患者中的研究報(bào)道較少。因此進(jìn)一步探討患者血漿中miRNAs與心肌肥厚之間的關(guān)系以及探討miRNAs對(duì)診斷左心室肥厚的臨床意義是非常有必要的。
　　研究目的：
　　很多體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，miR-26b、miR-30a參與了心臟肥厚及心肌重構(gòu)的發(fā)生發(fā)展，但在心室肥厚患者體內(nèi)的作用還待進(jìn)一步證實(shí)。本實(shí)驗(yàn)旨在研究患者血漿中miR-26b和miR-30a與HTN-LVH和H

6、CM的相關(guān)性以及對(duì)HTN-LVH和HCM患者的診斷價(jià)值，并進(jìn)一步探討miR-26b和miR-30a對(duì)鑒別HTN-LVH與HCM患者的臨床意義。
　　研究方法：
　　按照本研究的納入標(biāo)準(zhǔn)和剔除標(biāo)準(zhǔn)收集2012年12月至2014年10月間到廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科住院部住院的患者，共收集到符合本研究的患者176例，根據(jù)本研究的納入標(biāo)準(zhǔn)和剔除標(biāo)準(zhǔn)分為HTN-LVH組（n=69）、HCM組（n=36）和高血壓無(wú)肥厚的對(duì)照組

7、（n=71）三組。收集所有患者的年齡、性別、高血壓病史、收縮壓、舒張壓、空腹血糖、糖化血紅蛋白、總膽固醇、總甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、超敏C反應(yīng)蛋白、血肌酐、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、B型腦鈉肽、左室內(nèi)徑、右室內(nèi)徑、室間隔厚度、左心室后壁厚度和左室射血分?jǐn)?shù)。入院次日清晨空腹抽取患者靜脈血，采用枸櫞酸鈉抗凝，經(jīng)2次離心后將血漿保存在-80℃冰箱，待一起用試劑盒提取總miRNA

8、s,再進(jìn)行miRNAs的逆轉(zhuǎn)錄，最后用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Quantificational reverse transcription polymerase chain reaction，qRT-PCR）檢測(cè)三組患者血漿中的miR-26b和miR-30a水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，首先應(yīng)用Shapiro-Wilk檢驗(yàn)法和Levene檢驗(yàn)法對(duì)所有統(tǒng)計(jì)的計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)于符合

9、正態(tài)分布且方差齊的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，對(duì)于不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)表示；計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)（％）和例數(shù)（n）表示。對(duì)于符合正態(tài)分布的計(jì)量資料三組間采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料三組間采用多組獨(dú)立二分類χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。組內(nèi)的miR-26b、miR-30a與室壁厚度的相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析法分析。使用MedCalc12.7軟件比較受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic c

10、urve，ROC曲線）并統(tǒng)計(jì)曲線下面積（Area under the curve，AUC），來(lái)評(píng)價(jià)miR-26b、miR-30a對(duì)心肌肥厚的診斷價(jià)值。所有分析檢驗(yàn)方法中均以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.血漿miR-26b水平在HTN-LVH組和HCM組均明顯低于高血壓無(wú)肥厚組（P<0.05），在HTN-LVH組和HCM組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血漿miR-30a水平在HTN-LVH組和HCM組均明顯高

11、于高血壓無(wú)肥厚組（P<0.05），在HTN-LVH組和HCM組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.HTN-LVH組和HCM組中miR-26b與IVSd、LVPWd呈負(fù)相關(guān)，miR-30a與IVSd、LVPWd呈正相關(guān)。
　　3.血漿miR-26b和miR-30a對(duì)診斷HTN-LVH和HCM有意義（AUC>0.5，P<0.01），miR-26b和miR-30a對(duì)HTN-LVH診斷的敏感度分別為81.2%、84.1%，特異度分別為7