羅格列酮對血管再狹窄影響的動物實驗和臨床研究.pdf

1、經(jīng)皮冠狀動脈成形術及支架置入術后的再狹窄率高達20-30％，嚴重影響其臨床療效，再狹窄已經(jīng)成為當今世界上心血管病領域中的一個難題。以藥物洗脫支架為代表的新醫(yī)療器械的應用，顯著降低了經(jīng)皮冠脈介入手術后再狹窄的發(fā)病率。然而其近期療效尚不完美，遠期療效還有待考證。因此，人們把更多的注意力放到可以防止再狹窄的藥物治療上。用于預防或治療再狹窄的藥物或藥物洗脫支架主要是通過抑制再狹窄的三個重要環(huán)節(jié)來發(fā)揮作用，即血栓、炎癥、血管平滑肌細胞增殖。

2、 噻唑烷二酮類藥物(TZDs)是過氧化物酶體增殖物活化受體γ(PPARγ)的配體，近幾年研究表明，該類藥物除了增加胰島素敏感性以外，還具有抑制VSMCs增殖、遷移以及抗炎等作用。其對于血管內皮功能的影響尚不明確，而且以上結果大多基于細胞、動物實驗等基礎研究。 目的： 建立再狹窄動物模型，結合動物實驗和臨床實驗對服用羅格列酮后，血管內皮功能、炎癥反應、血管平滑肌細胞的增殖情況進行了系統(tǒng)地觀察和研究。 方法：

3、 本研究的前兩部分為動物實驗。第一部分是利用PTCA球囊導管成功建立大鼠頸動脈內膜球囊損傷模型，通過HE染色、彈力纖維染色觀察損傷血管不同時期的形態(tài)變化，并測定各層面積。第二部分在給予羅格列酮干預治療后，通過HE染色、彈力纖維染色觀察損傷血管的形態(tài)變化，測定各層面積；采用免疫組織化學法測定血管平滑肌細胞的增殖率及血管壁細胞中NF-κB的表達；采用Tunnel法測定血管平滑肌細胞的凋亡率。 本實驗后兩部分為臨床研究。將觀察對象按

4、是否服用羅格列酮分為治療組及對照組，分別從外周靜脈在術前和術后1個月內幾個時間點取血標本。第三部分觀察患者術后血炎癥因子水平的變化，了解羅格列酮對炎癥因子的影響。第四部分觀察患者術后血管內皮活性物質水平的變化，了解羅格列酮對內皮系統(tǒng)合成、釋放血管內皮活性物質水平的影響。 結果： （一）大鼠頸總動脈損傷血管再狹窄模型的建立 1.與未損傷側血管相比，損傷后7d新生內膜已經(jīng)形成并增厚，可見較多的血管平滑肌細胞（VSMC

5、）增殖；損傷后14d VSMC的增殖減弱，細胞外基質（ECM）增加，內膜繼續(xù)增厚；損傷后28d內膜繼續(xù)增厚，管腔嚴重縮窄。 2.與未損傷側血管相比，損傷后7d新生內膜面積明顯增大；14d-28d，新生內膜面積繼續(xù)增大。而中膜面積無顯著變化。 （二）羅格列酮對大鼠頸動脈球囊損傷后平滑肌細胞增殖和凋亡的影響 1.經(jīng)羅格列酮治療后，新生內膜面積顯著降低，管腔狹窄指數(shù)顯著降低。 2.經(jīng)羅格列酮治療后，平滑肌細胞

6、增殖率顯著降低，細胞凋亡率顯著升高，NF-κB的表達亦顯著降低。 （三）羅格列酮對冠心病合并糖尿病患者介入術后血炎癥因子水平的影響 1.MCP-1、ICAM-1兩指標在治療組及對照組中，術后24h、術后7d與術前比較，均有顯著性差異；而兩指標在兩組間同期比較，術后24h、術后7d均有顯著性差異。 2.CRP該指標在治療組及對照組中，術后24h、術后7d、術后1m與術前比較，均有顯著性差異；該指標在兩組間同期比較，

7、僅在術后24h有顯著性差異。IL-6該指標在治療組及對照組中，術后24h、術后7d與術前比較，均有顯著性差異；該指標在兩組間同期比較，在術后24h、術后7d均有顯著性差異。 （四）羅格列酮對冠心病合并糖尿病患者介入術后血管內皮活性物質水平的影響 NO、NOS、ET-1均在24小時、7天與組內術前比較出現(xiàn)顯著性差異；在1個月時，僅治療組的NO、NOS與術前仍有顯著性差異；兩組間同期比較，NO、NOS、ET-1均在24小時、

8、7天有顯著性差異；NO、NOS在1個月時兩組間仍有顯著性差異。 結論： 1.利用PTCA球囊導管成功建立了大鼠頸動脈內膜球囊損傷血管再狹窄模型，為再狹窄的研究提供了基礎。 2.血管內皮損傷后，VSMC遷移、大量增殖，產(chǎn)生ECM，導致血管內膜增生，是PTCA術后再狹窄的主要病理機制。 3.羅格列酮能明顯抑制球囊擴張術后血管內膜的增生。羅格列酮對血管內膜的增生的抑制作用與該藥物干預細胞增殖周期、抑制VSMCs

9、增殖并促進其凋亡有關，并和NF-κB的下調表達相關。 4.冠心病患者介入術后炎癥反應激活主要發(fā)生在支架置入術后7天到1個月內。主要是術中損傷、內皮的修復以及支架置入導致的。內皮修復完整后，炎癥逐漸消退。與對照組比較，羅格列酮可以顯著降低支架置入術后的血炎癥因子水平，抑制炎癥反應。 5.冠心病患者介入術后，血管內皮功能受損，主要發(fā)生在支架置入術后1個月內。主要的表現(xiàn)是NO、NOS水平下降，ET-1水平升高。與對照組比較，羅