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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:制備不同純度的大鼠胰島,探討不同純度胰島中所攜帶的CK.19、PDX一1陽(yáng)性細(xì)胞。 方法:取30只SD雄性大鼠隨機(jī)分成3組,采用膠原酶V型胰管灌注分離消化及FicoH純化,制備三種不同純度的胰島。A組(N=10):胰島沉淀物不進(jìn)行純化;B組(N=10):胰島沉淀物中依次加入25%的Fic0¨和Hank’S液純化;C組(N=10):胰島沉淀物依次加入25%、11%的FicoU和Hank’S液純化。應(yīng)用免疫組織化學(xué)、RT-PC
2、R方法對(duì)三種不同純度胰島中細(xì)胞角質(zhì)蛋白19(CK一19)、胰十二指腸同源框(PDX一1)的表達(dá)做分析。 結(jié)果:(1)采用不同的純化方法所得胰島純度,A組:43.6土6.29%;B組:653士4.40%;C組:77.6士636%。各組間具有顯著差異性(P<0.05)。(2)采用不同的純化方法所得胰島產(chǎn)量,A組:791.7土72.87個(gè);B組:722.6土52.41個(gè);C組:709.2土52.90個(gè)。B、C組問(wèn)不具有顯著差異性(P>
3、0.05),而A組與B、C組問(wèn)有顯著差異性(P 4、0.01l8。各組問(wèn)具有顯著差異性(P<0.O001)。(5)RT-PCR結(jié)果分析,不同純度胰島中CK一19mRNA的表達(dá)(10D值),A組:0.6097土0.1893;B組:0.4720土O.¨57;C組:0.3340士O.0998。各組問(wèn)具有顯著差異性(P<0.05)。(6)RT-PCR結(jié)果分析,不同純度胰島中PDx一1mRNA的表達(dá)(10D值),A組:0.6393士O.1500;B組:0.4325±O.1571;C組:0.2981
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