超聲激活血卟啉對腹水型S180腫瘤細胞骨架影響的研究.pdf

1、癌癥研究已經(jīng)有幾百年的歷史了，但至今仍是威脅人類健康的主要惡性疾病之一。目前，治療癌癥的方法有很多種，傳統(tǒng)的治療方法包括手術療法、放療和化療等，但放療和化療對人體傷害很大，而手術治療往往又會導致腫瘤細胞隨血液循環(huán)發(fā)生轉(zhuǎn)移。1978年，美國學者Doughtery等首先提出光動力學療法，并已經(jīng)應用于臨床診斷治療腫瘤。但由于光的穿透能力差，該方法主要應用于人體表面淺層腫瘤的治療，對深部和中晚期腫瘤的治療具有一定的困難。聲動力學療法(Sonod

2、ynamic therapy,SDT)是 Umemura S等人于1989年在光動力學療法(Phototdynamic Therapy,PDT)的基礎上提出的抗癌新思路和新方法，它是利用超聲激活富集且能長時間潴留于腫瘤細胞內(nèi)的聲敏劑產(chǎn)生抗腫瘤因子從而殺傷腫瘤細胞。由于聲敏劑可以特異地聚集于腫瘤細胞，以及聚焦超聲照射對周圍健康組織基本沒有損傷，因此SDT療法具有良好的應用前景，在腫瘤治療中受到了人們的廣泛重視。近年來國內(nèi)外學者就SDT療法

3、進行了廣泛而深入的研究，主要集中在其抗腫瘤機制的探討，并提出了空化效應、單線態(tài)氧理論、羥自由基理論以及烷氧自由基理論等，但目前尚無定論。前期實驗研究表明，聲動力療法對腫瘤細胞具有殺傷和誘導細胞凋亡兩種模式，但對于SDT療法抑制腫瘤生長和誘導腫瘤細胞凋亡的生物學途徑和機制方面研究較少。研究表明超聲激活血卟啉處理后，腫瘤細胞相關骨架蛋白表達受到抑制，并且可能在細胞凋亡或壞死中起重要作用。 本論文依托國家自然科學基金項目“超聲激活血卟

4、啉誘導腫瘤細胞凋亡的分子機制的研究”的支持，采用頻率為1.34 MHz，3 W/cm<'2>的處理條件研究了超聲激活血卟啉對腹水型S180腫瘤細胞骨架蛋白的影響，所得實驗結(jié)果如下： 1．超聲激活血卟啉對細胞質(zhì)骨架的影響：實驗采用免疫細胞化學技術研究超聲激活血卟啉作用于S180腫瘤細胞后，不同時間段取材細胞質(zhì)骨架蛋白Actin、Tubulin、Vimentin(波形蛋白，中間纖維的一種)的動態(tài)表達變化。研究結(jié)果表明：單獨血卟啉對三

5、種細胞質(zhì)骨架蛋白的表達無明顯抑制作用；單獨超聲對三種細胞質(zhì)骨架蛋白表現(xiàn)出一定程度的抑制作用；而超聲結(jié)合血卟啉組聯(lián)合作用對Actin、Tubulin、Vimentin的抑制作用明顯高于單純超聲處理組，并且其抑制效應呈時間依賴性變化，說明超聲激活血卟啉顯著增強了單純超聲的細胞毒作用，抑制細胞質(zhì)骨架蛋白的表達，影響細胞的分裂與增殖，降低細胞的生存能力，導致細胞壞死或凋亡。 2．超聲激活血卟啉對細胞核骨架的影響：聲動力學處理后，采用免疫

6、細胞化學的方法檢測S180腫瘤細胞在不同時間取材LaminA和LaminB的表達變化情況。實驗結(jié)果表明：單獨血卟啉組對LaminA和LaminB無明顯的表達抑制作用；單純超聲作用于S180腫瘤細胞后，LaminA、LaminB表達量減少，并隨取材時間的延長，其蛋白表達量持續(xù)減少，超聲處理后3小時，腫瘤細胞內(nèi)LaminA和LaminB的表達量均急劇下降，并且通過比較發(fā)現(xiàn)，LaminA比LaminB對超聲的敏感性更強；而同等實驗條件下，超聲