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1、本課題以從豬軟骨中提取的短鏈多糖為研究對(duì)象,采用小鼠肉瘤S180細(xì)胞分別建立動(dòng)物腹水瘤模型和實(shí)體瘤模型,研究其抗腫瘤免疫保護(hù)的作用機(jī)制。
建立S180腹水瘤模型,建模5天后開始給藥軟骨多糖治療研究軟骨多糖與小鼠生命延長(zhǎng)率關(guān)系,脾指數(shù)和胸腺指數(shù)的變化。HE染色觀察小鼠脾細(xì)胞的變化。建模后治療并觀察軟骨多糖對(duì)S180荷瘤小鼠的細(xì)胞免疫作用。MTT比色法考察軟骨多糖對(duì)S180實(shí)體荷瘤小鼠免疫系統(tǒng)的影響,分別測(cè)量ConA和LPS刺
2、激下小鼠脾細(xì)胞和外周血淋巴增殖情況,發(fā)現(xiàn)其能夠不同程度的提高小鼠的T細(xì)胞和B細(xì)胞刺激指數(shù)。NK細(xì)胞殺傷活性實(shí)驗(yàn)和E花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)表明軟骨多糖能提高外周血NK細(xì)胞和脾NK細(xì)胞的活性,及外周血單個(gè)核細(xì)胞E花環(huán)形成率。脾細(xì)胞涂片的免疫熒光檢測(cè)得到跨膜糖蛋白CD40和CD40L的表達(dá)水平也有一定程度的上調(diào)。流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群的變化,軟骨多糖能使CD3+、CD4+細(xì)胞及CD4+/CD8+細(xì)胞比值明顯升高,從而達(dá)到調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞亞群的
3、比例,起到調(diào)整細(xì)胞免疫功能的作用,使機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能得到進(jìn)一步改善。巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)表明軟骨多糖能提高巨噬細(xì)胞吞噬中性紅和雞紅細(xì)胞的能力,血細(xì)胞染色說明軟骨多糖能提高外周血中性粒細(xì)胞(PMN)的數(shù)量,從而起到抗腫瘤的作用。
軟骨多糖對(duì)荷瘤小鼠體液免疫的作用:單向瓊脂擴(kuò)散免疫實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在軟骨多糖的作用下,荷瘤小鼠分泌的抗體IgG抗體明顯增加,增強(qiáng)體液免疫效應(yīng),有助于腫瘤免疫。用ABC-EI,ISA法測(cè)定小鼠外周血細(xì)胞因子的
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