補氣中藥對 S180荷瘤小鼠細(xì)胞線粒體、周期蛋白、CD4-CD8、P53蛋白的影響.pdf

1、目的： 觀察補氣中藥對S180荷瘤小鼠重要生命臟器線粒體形態(tài)的影響并探討其作用機(jī)制。方法：通過建立 S180 荷瘤動物模型,按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對照組、模型對照組、環(huán)磷酰胺( cyclophosphamide,CTX)組、黃芪注射液組、絞股藍(lán)組、人參皂苷 Rg1 組和十全大補湯組,每組 15 只。分別給予黃芪注射液、人參皂苷 Rg1 腹腔注射給藥,絞股藍(lán)、十全大補湯灌胃給藥,連續(xù)給藥 10 天。實驗過程中觀察小鼠一般情況,如毛發(fā)、活動

2、情況、飲食、體重。最后一次給藥 12h 后,摘眼球取血后處死小鼠,選取心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦和腫瘤,分別用 10%甲醛溶液和 4%戊二醛溶液固定；ELISA 檢測小鼠血清中 CD4+、CD8+、P53、細(xì)胞周期蛋白 D1 和細(xì)胞周期蛋白 G2 的含量；光鏡技術(shù)觀察各組小鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦和腫瘤的病理組織學(xué)結(jié)構(gòu)；電鏡技術(shù)觀察各組小鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦和腫瘤線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的改變。結(jié)果：小鼠一般情況結(jié)果

3、：正常組毛發(fā)有光澤,活動、飲食、體重均正常。模型組毛發(fā)光澤度欠佳,豎毛現(xiàn)象嚴(yán)重,活動度逐漸減少,飲食明顯減少,體重減輕。CTX 組毛發(fā)無光澤,有豎毛現(xiàn)象,活動逐漸減少,飲食下降,體重明顯減輕。黃芪注射液組和十全大補湯組毛發(fā)、活動、飲食、體重與正常組相比無顯著改變。絞股藍(lán)組和人參組毛發(fā)無明顯改變,活動、飲食、體重而有所下降。用藥各組腫瘤大小除絞股藍(lán)組外與模型組相比均有明顯縮小(P﹤0.05)。CD4+檢測結(jié)果：用藥各組除絞股藍(lán)組外與模型組

4、相比均有顯著性差異 (P﹤0.05)。CD8+檢測結(jié)果：用藥各組與模型組相比,只有黃芪組具有顯著性差異(P<0.05)。P53 表達(dá)用藥組中黃芪、人參、十全大補組與模型組相比有差異性( P<0.05)。周期蛋白 D1 和周期蛋白 G2 的檢測結(jié)果在組間的表達(dá)具有差異性,且兩者的表達(dá)組內(nèi)呈負(fù)相關(guān)；常規(guī)病理組織學(xué)定量分析顯示,在腫瘤組織和壞死組織體密度,黃芪組、CTX 組、人參皂苷 Rg1、十全大補組與模型對照組相比具有顯著性差異 (P <

5、0.05)。實驗各組各器官的線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的變化差異顯著,主要表現(xiàn)為線粒體嵴變短或消失,嵴間腔擴(kuò)大。結(jié)論： 本實驗證實了黃芪注射液能夠通過上調(diào)周期蛋白 G2(cyclinG2)的表達(dá),下調(diào)周期蛋白 D1(cyclinD1)的表達(dá),同時上調(diào) P53 蛋白的表達(dá),抑制細(xì)胞增殖,起到使腫瘤細(xì)胞死亡的作用。推測這一機(jī)制與機(jī)體的細(xì)胞免疫無關(guān),因本次試驗給藥僅 10 天,不足以使小鼠機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答。人參皂苷 Rg1、絞股藍(lán)也具有類似的通過調(diào)控