黃粉蟲活性蛋白的提取純化及其作用性質(zhì)研究.pdf

1、黃粉蟲因其營養(yǎng)成分高,營養(yǎng)含量居各類活體動物蛋白飼料之首,被譽為“蛋白質(zhì)飼料寶庫”。黃粉蟲的養(yǎng)殖逐漸形成規(guī)?；?成為蓬勃發(fā)展的新興產(chǎn)業(yè)。黃粉蟲的利用和開發(fā)已達(dá)到一定的高度,主要是其生物學(xué)特性、飼養(yǎng)管理、食品開發(fā)等方面。隨著中醫(yī)藥的發(fā)展,黃粉蟲的藥理研究越來越深入,在醫(yī)療保健中越來越多地得到應(yīng)用。
　　 本文從黃粉蟲體內(nèi)提取純化得到一種活性蛋白,并對其抗血栓和抗癌作用進(jìn)行了初步的研究。采用硫酸銨鹽析法對其蛋白質(zhì)進(jìn)行提取,用DEAE

2、-32纖維素層析柱和Sephadex G-75葡聚糖凝膠柱對所分離黃粉蟲蛋白粗提液進(jìn)行純化,得到相對分子質(zhì)量約為56.1kD的單一組分蛋白。經(jīng)檢測,黃粉蟲活性蛋白具有纖溶活性,每毫克黃粉蟲活性蛋白相當(dāng)于98.03尿激酶國際標(biāo)準(zhǔn)活力單位,其蛋白濃度為7.1066mg.mL-1,糖含量為7.084％。研究了不同物化因子對黃粉蟲活性蛋白的影響。Na+和K+對黃粉蟲活性蛋白的纖溶活力基本無影響,而Mg2+和Ca2+則對其活力有一定的抑制作用,1

3、0mol-mL-1的尿素和1％的巰基乙醇可完全抑制其活力。黃粉蟲活性蛋白的最適反應(yīng)溫度為25℃～45℃,最適pH為7.5～8.0。實驗采用急性毒性實驗對黃粉蟲活性蛋白的安全性進(jìn)行初步研究,結(jié)果表明黃粉蟲活性蛋白安全。同時對黃粉蟲活性蛋白的溶血性做了檢測,其溶血率小于5％,不引起體外紅細(xì)胞的明顯溶血,安全性好。對黃粉蟲活性蛋白進(jìn)行體外溶栓實驗,結(jié)果表明其具有溶栓作用,并且血凝塊的溶解率隨著黃粉蟲活性蛋白濃度的增加而增加。血栓與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移

4、關(guān)系密切。因此,本文通過黃粉蟲活性蛋白對雞胚尿囊膜新生血管和S180腹水瘤的抑制作用實驗,得到兩點結(jié)論。⑴黃粉蟲活性蛋白能使雞胚尿囊膜血管明顯變細(xì)、數(shù)目變少,能明顯抑制新生血管的生成；⑵黃粉蟲活性蛋白直接作用于S180腹水瘤,腫瘤細(xì)胞數(shù)減少,腹水體積減少,效果顯著。據(jù)此表明它極可能是通過血管生成抑制途徑產(chǎn)生體內(nèi)抑瘤效應(yīng)的,并且它抑制血管生成的作用與溶栓活性存在一定的相關(guān)性。然而它含有的溶栓活性蛋白組分是否有直接殺傷腫瘤細(xì)胞的作用,尚待進(jìn)